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项目名称：Grp75 在细胞缺糖损伤中的保护作用

发布时间： 2024-01-16

获奖证书编号：2010-HJC-1-14

该项目获得国家自然科学基金资助 (39670239) 和美国中华医学基金会资助项目

(96—635)。

本课题通过建立过表达 grp75 的细胞克隆以无糖培养模拟能量代谢应激，来研究

grp75 对处于能量代谢性应激的细胞的保护作用，以及应激后细胞的恢复情况，为临床上积极探讨细胞缺血性损伤的机制及其有效防治措施提供理论依据，属于基础医学研究。

本课题通过表达载体（pcDNA3/grp75）质粒的扩增、提取各酶切鉴定 , 细胞的培养、转染、选择和克隆鉴定，缺糖再灌流测定模型细胞建立，乳酸脱氢酶（LDH）释放百分率测定，MTT 比色法测定细胞生长活性，亚二倍体细胞百分比测定，探讨细胞缺血性损伤的机制。本研究建立了缺血再灌注的体外培养模型；缺血再灌注后，过表达 grp75 的细胞较未转染的细胞具有更高的存活率，细胞膜损伤和 DNA 损伤较轻；过表达 grp75 的细胞对缺糖后再灌注损伤具有一定的保护作用。其研究论文发表于核心期刊《实验生物学报》。

主要创新点：1. 以 grp75/pcDNA3 表达载体转染中国仓鼠肺细胞（CHL）细胞株， 经 western 印迹鉴定获得过表达 grp75 的细胞克隆。2. 建立缺血再灌注的体外培养模型。3. 再灌注后，过表达 grp75 的细胞较未转染的细胞具有更高的存活率，细胞膜损伤和DNA 损伤较轻；过表达 grp75 的细胞缺糖后再灌注损伤中具有一定的保护作用。

代表性论文的引用情况：研究论文已被国外著名出版社 Springer 于 2007 年出版的， 由哈佛大学教授 Calderwood 等主编的专著《Heat Shock Proteins in Cancer》引用，亦已被斯坦福大学、东京大学等的学者在SCI 收录期刊上引用4 次，他引文献分别来自：《Cell Stress and Chaperones》2006,11(2):116-128；《Experimental Gerotology》2007,42(4):263- 274；《American Journal of Physiology- Renal Physiology》2007,293(4):F994-F1006；《Journal of Cerebral Blood Flow and Metabolism》2008,28(5):1009-1016，引用期刊的影响因子合计 15.295。获奖成果对推动本行业技术创新：国外同行引用情况表明，本研究成果达国际先进水平，为临床脑缺血病人细胞损伤的研究提供了一定的可靠理论依据。

个人成长成才、事业发展：该项目的研究有效促进了本人的科研方法及科研能力提升。该项目获得第二届淮海科学技术奖一等奖，主要完成人：高璀乡、李向荣、李玉华，完成单位：江苏医药职业学院（原盐城卫生职业技术学院）。

来源：淮海科学技术奖委员会办公室