科创中国

行业领域

生物与新医药技术,医药生物技术,医疗仪器技术、设备与医学专用软件,新剂型及制剂技术

需求背景

项目是基于MDCK细胞培养的四价流感病毒裂解疫苗的研发，能够填补国内细胞流感疫苗的市场空白，并将逐步取代或部分取代现有的鸡胚流感疫苗，具有广阔的市场前景，对于流感，特别是大流行流感的预防具有非常重要的社会意义。项目以盟主单位为主体，揭榜单位协助盟主解决研发过程中的关键技术问题。摸索并确定项目工艺参数，建立中间品和成品质量检定方法，建立工艺规程和质量标准。

需解决的主要技术难题

1.哺乳动物细胞大规模培养技术：MDCK细胞来源于哺乳动物的传代细胞，根据MDCK细胞特性，通过生物反应器大规模培养技术研究细胞生长和代谢等工艺参数，如：细胞培养温度、培养时间、培养基浓度、传代比例以及细胞生长曲线等。

2.病毒培养技术：国内现有流感疫苗均以鸡胚为基质，受限于鸡胚来源难于短期大规模扩产。本项目采用易于短期内快速扩增的MDCK为细胞基质进行生物反应器大规模病毒扩增，对病毒扩增过程中病毒M.O.I值、接种时间、收获时间、培养温度、培养基浓度、PH值等工艺参数进行研究确定。

3.纯化技术：研究MDCK细胞流感疫苗过程中，通过梯度离心及层析技术进行纯化,有效去除杂蛋白和宿主细胞DNA,提高产品安全性,降低不良反应。

期望实现的主要技术目标

1.建立生物反应器大规模MDCK细胞培养技术平台。

2.建立三级细胞细胞库，无细菌、真菌以及支原体污染，冻存前的细胞活力不低于90%，复苏后的细胞活力不低于80%。

3.建立三级病毒种子库，无细菌、真菌以及支原体污染，病毒血凝滴度应不低于1:160。

4.纯化后的病毒原液，无细菌、真菌污染，杂蛋白质去除率高，总蛋白质含量不高于血凝素含量的4.5倍。

处理进度