行业领域

生物产业

需求描述

1.服务需求背景:

细菌素是由细菌产生的，通常只作用于与产生菌同种的其它菌株或亲缘关系很近的种的 一种蛋白类抗菌物质。它是一种多肽或多肽与糖和脂的复合物。

乳酸菌所产的细菌素引起人们的特别兴趣。因为这些菌种总体上被认为是安全的。另外， 产细菌素的乳酸菌大多数来自于自然中的食物，所以它们特别适合用于食品中。

目前，对细菌素的研究主要是通过筛选发现产细菌素菌株，并对其特性进行研究。随着 对细菌素研究的进一步深入，有必要探明细菌素分子特性以及遗传学特性，而细菌素的纯化是 这些研究的重要基础。目前已经纯化出多种细菌素，纯化细菌素的方法多种多样，主要有： 有机溶剂沉淀法、吸附法、热变性法、离子交换、凝胶层析、高效液相色谱等等。

2.服务需求具体内容:

1、 一种采用发酵法生产嗜热链球菌细菌素的方法。其特征在于：所述方法中的菌种为嗜 热链球菌(Streptococcus thermophilus)CGMCC ***，培养温度为28～37℃，培养基为改 良MRS培养基，其组成为：葡萄糖10～30g/L、蛋白胨1～10g/L、牛肉膏1～10g/L、酵母膏 ***～5g/L、K2HPO4·3H2O ***～2g/L、乙酸钠***～5g/L、柠檬酸铵***～2g/L、MgSO4·7H2O ***～***、***～***、吐温***～***。培养方式为三角瓶静置培养或 低速摇床振荡培养，或发酵罐培养。培养时间12～36h，培养至菌体密度约106～109cfu/mL。

2、 根据权利要求1的方法，将发酵得到的嗜热链球菌细菌素进行纯化的方法。分离纯化 的主要步骤包括：pH吸附释放法、旋转蒸发浓缩、凝胶层析。

3、 根据权利要求2的方法进行嗜热链球菌细菌素纯化。其特征在于：将按所述培养方法 得到的发酵液调节***～***，4～30℃振荡2～12h使嗜热链球菌细菌素充分吸附到菌体上。

4、 根据权利要求2的方法进行嗜热链球菌细菌素纯化。其特征在于：离心收集吸附了嗜 热链球菌素的菌体，用***的磷酸钠溶液(5mmol/L)洗涤菌体1～3次，最后将菌体悬浮 于***的NaCl溶液(100mmol/L)中，振荡5～12h后离心去除菌体。

3.具体的服务需求完成后所要达到的标准或效果:

(1) 对酶的敏感性：将蛋白酶K、胃蛋白酶、木瓜蛋白酶、α-胰凝乳蛋白酶及α-淀粉酶 分别配制成10mg/mL的溶液，分别取100μl加入到400μl嗜热链球菌细菌素提取液中，使 各种酶的终浓度为2mg/mL，37℃下处理4h，未加酶的嗜热链球菌细菌素提取液作为对照， 检测酶对嗜热链球菌细菌素活性的影响。结果表明，嗜热链球菌细菌素提取液经以上各种酶 液处理后，无抑菌圈出现，即细菌素活性消失，对照抑菌圈直径不变，表明嗜热链球菌细菌 素为一种肽类物质

(2) 对酸的稳定性：将嗜热链球菌细菌素提取液用5mol/L HCl和5mol/L NaOH调节 pH为***～***。37℃下温育4h，再将pH调至***，分别测定其抑菌活性。结果表明，嗜热 链球菌细菌素在***～***范围内活性保持稳定，pH＞***时活性降低

(3) 对热的稳定性：将嗜热链球菌细菌素提取液在100℃处理2h，以未热处理的样品 为对照，测定其抑菌活性。结果表明活性基本不变

4.发明人

谭之磊;李 琳;贾士儒;王国良;范宝庆;曹美娜;莫治文

联系人：宋巍；刘胜斌

联系电话：022-60600153；022-60600161