科创中国
一种香鱼格留虫RPA-LFD快速检测的引物探针组合、方法及其应用
成果类型：: 发明专利
发布时间: 2026-04-01 09:58:15
科技成果产业化落地方案
方案提交机构：成果发布人| 徐景新 | 2026-04-01 09:58:16
本发明公开了一种香鱼格留虫RPA‑LFD快速检测的引物探针组合、方法及其应用，属于生物技术领域。所述引物探针组合由序列如SEQ ID NO.3所示的上游引物、序列如SEQ ID NO.4所示的下游引物和序列如SEQ ID NO.7所示的探针组成。基于所述引物探针组合建立的香鱼格留虫的RPA‑LFD检测方法具有灵敏高、特异性好、操作简便、结果可视化等优势，可以准确检测香鱼格留虫，有效降低香鱼格留虫病带来的经济损失。本发明提供的香鱼格留虫RPA‑LFD快速检测方法不需要专用仪器，样品处理简单、扩增快速、结果直观，样品的最低检测限可达9.38×10‑6ng/μL，比传统PCR方法提高1000倍。
该检测方法的核心技术在于“特异性引物设计-探针优化-LFD可视化”三位一体体系。基于香鱼格留虫18S rRNA基因保守序列设计特异性引物与探针，其中探针内部引入四氢呋喃位点，通过核酸内切酶切割实现信号放大。RPA反应体系经优化后可在便携式恒温仪中完成，扩增产物通过侧向层析试纸条实现可视化判读，阳性结果呈现双线，阴性结果仅质控线显色。通过优化引物浓度、反应时间与温度，建立了标准化的检测流程，检测结果可通过手机拍照保存，实现检测数据可追溯。
该RPA-LFD检测方法可广泛应用于香鱼养殖过程中的寄生虫病监测、种苗检疫、流行病学调查及进出口检验检疫等领域。特别适用于养殖场、基层渔技推广站及海关口岸等缺乏专业PCR实验室的场景，对香鱼格留虫的早期预警与防控具有重要价值。随着香鱼养殖集约化发展及国际贸易对水生动物卫生要求提升，对快速、便携、低成本的病害检测技术需求持续增长。该技术还可拓展至其他水产寄生虫如刺激隐核虫、车轮虫等的快速检测，具备良好的技术延伸性。
青岛农业大学始建于1951年，是山东省属公办多科性大学。学校位于青岛市城阳区、平度市及莱阳市（青岛农业大学海都学院），总占地面积约5220亩。现设有25个教学院部，涵盖农、工、理、经、管、文、艺、法、医等9大学科门类，在校生4万余人。学校以农学与生物科学为特色，拥有作物学、植物保护、畜牧学等多个国家级特色专业及一流本科专业建设点，建有国家级科研平台与众多省部级创新基地。学校坚持“厚德、博学、笃行、致远”的校训，致力于培养高素质应用型人才，服务区域经济社会与现代农业发展。
本成果产生的效益显著。产业效益上，快速检测技术帮助养殖户在病害暴发早期采取隔离与治疗措施，降低死亡率，减少经济损失；种苗检疫可有效阻断病原垂直传播与跨区域扩散。经济效益上，检测成本较传统PCR方法降低50%以上，无需昂贵设备与专业实验室，适合基层推广应用。社会效益上，保障了香鱼养殖业健康发展，提升了水产品质量安全水平。技术效益上，推动了RPA-LFD技术在水产寄生虫检测领域的应用示范。产业层面，增强了我国在水产病害快速检测技术领域的自主创新能力，为水产养殖绿色高质量发展提供技术支撑。
技术转让，许可，合作所需资金需双方协商，此项技术想尽快落地，希望具备此项技术研发的技术方，能够尽快承接此项目。
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