一种分离纯化真核细胞核糖体并用于体外翻译的方法
成果类型:: 发明专利
发布时间: 2024-11-22 08:54:09
本发明属于生物技术领域,涉及一种分离纯化真核细胞核糖体并用于体外翻译的方法。
本发明提供了一种分离纯化真核细胞80S核糖体并用于体外翻译的方法。所分离的核糖体结构完整,颗粒均一,可观察到核糖体大小亚基、mRNA通道等核糖体重要结构。该方法适用于体外培养的细胞系以及原代骨髓单核细胞。体外培养细胞系HL60中所分离核糖体翻译活性稍高于小鼠骨髓细胞中核糖体。同时,利用该方法检测到敲除SNORD113‑114基因簇的小鼠骨髓细胞核糖体翻译活性显著降低,与其它方法所得到的实验结论一致。
生物医学研究领域:在蛋白质合成机制的研究中,该方法可以提供纯净的核糖体,用于体外翻译实验。这有助于深入了解真核细胞中基因表达的调控机制,对于研究疾病相关基因的翻译过程、开发新的药物靶点具有重要意义。例如,在癌症研究中,可以利用分离纯化的核糖体研究癌细胞中异常的蛋白质合成过程。
药物研发与筛选:在药物研发过程中,体外翻译系统是筛选药物靶点和评估药物对蛋白质合成影响的重要工具。通过该方法获得的核糖体和体外翻译体系,可以用于高通量筛选能够调节蛋白质合成的药物,加快药物研发的进程,提高药物研发的效率。
生物技术产业应用:在生物技术公司生产重组蛋白的过程中,该方法可以用于优化蛋白表达系统。利用分离纯化的核糖体进行体外翻译,可以精确控制蛋白合成的条件,提高重组蛋白的产量和质量,满足生物制药、诊断试剂等行业对蛋白质的需求。
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本发明提供一种分离纯化真核细胞80S核糖体的方法,并将所分离核糖体用于体外翻译反应。借助RRL系统,将其内源核糖体通过超速离心去除干净,经测试处理后的RRL翻译活性可忽略不计。利用此经过处理的RRL系统,测试发现所分离核糖体具有翻译外源luciferase mRNA活性。
技术转让,许可,合作所需资金需双方协商,此项技术想尽快落地,希望具备此项技术研发的技术方,能够尽快承接此项目。