禽脑脊髓炎又称流行性震颤, 是由禽脑脊髓炎病毒(AEV) 引起鸡、鹌鹑和火鸡的一种急性、高度接触性传染病。本专利建立了一种快速检测鉴别AEV的环介导等温扩增（LAMP）方法。在AEV VP2基因保守序列设计了六条特异的环介导等温扩增引物组（包括2条内引物FIP和BIP、2条外引物两条F3和B3、2条环引物），利用该引物组、扩增缓冲液进行等温扩增，可特异检出AEV，最低检出限为100fg/µL，比常规RT-PCR敏感100倍。

利用该引物组进行LAMP检测可特异检出AEV，最低检出限为100fg/µL。具有特异、敏感且成本低等特点，不需要昂贵的仪器并且操作方法更简单，适于临床快速检测。

禽脑脊髓炎(avian encephalomyelitis，AE)又称流行性震颤，是由禽脑脊髓炎病毒(avian encephalomyelitis virus，AEV)引起的青年鸡、雉鸡、鹌鹑和火鸡的一种急性、高度接触性传染病。该病通过消化道感染家禽，侵害鸡的中枢神经系统和其它实质性器官，病毒经蛋垂直传播，导致孵化率下降，感染雏鸡在1-7日龄出现震颤、运动失调等症状，随着鸡日龄的增长，这些临床神经症状慢慢不表现。另外，病毒感染产蛋鸡，可导致产蛋鸡产蛋量轻微下降，对养禽业尤其是种禽饲养业危害极大。

目前，实验室检测脑脊髓炎病毒的方法有病毒分离、PCR方法和荧光PCR检测方法等，但是病毒分离鉴定存在耗时长、敏感性较低、不易标准化等缺点，在实际应用中具有一定的局限性。目前已建立的禽脑脊髓炎病毒PCR方法和荧光PCR检测方法，虽然检测的敏感性也比较高，但是常规PCR需要使用PCR仪和进行凝胶电泳等，而荧光PCR检测方法需要昂贵的荧光PCR仪和昂贵的试剂，不利于在临床中推广。LAMP具有特异性强、敏感性高、快速且成本低、操作方法更简单，适于现场快速检测。

谢芝勋(1963.1一)，男，广西博白人。1983年毕业于广西农学院畜牧兽医系兽医专业。二级研究员，硕士研究生导师，现任广西壮族自治区兽医研究所副所长，国家“万人计划”领军人才、“新世纪百千万人才工程”国家级人选、享受国务院特殊津贴专家、广西特聘专家和广西优秀专家。主要从事动物传染病综合防控技术的研究，开展了一系列高水平科研项目的研究工作，先后主持了国家自然科学基金、国家科技成果转化项目、科技部、农业部、广西科技攻关重大专项和广西自然科学基金重点项目等30多个项目的研究，在动物传染病(包括禽病、猪病、牛病、虾病和贝类疾病等)防控技术的研发上取得一批具有国内领先和国际先进水平的科研成果，解决养殖业发展一系列技术关键问题，促进了行业技术进步，产生了显著经济效益和社会效益。

本发明的实验证明，与现有技术相比，其优点和积极效果表现在：本发明建立了禽脑脊髓炎病毒LAMP检测试剂盒及其检测方法，本试剂盒根据禽脑脊髓炎病毒的VP2基因保守区设计了两个特异性内引物、两个特异性外引物和两个特异性环引物，该保守基因序列为禽脑脊髓炎病毒所共有。常规的LAMP方法，需要在反应结束后开盖加入SYBR Green I或Gene Finder染料来显色，反应产物易形成气溶胶而污染周围环境，容易污染环境而造成假阳性，同时SYBR Green I或Gene Finder染料还会因为引物二聚体而引起假阳性。因此本发明使用钙黄绿素+氯化锰替代了SYBR Green I和Gene Finder这些染料，在配置LAMP反应液时就可以加入反应液中，无需LAMP反应后开盖，并且钙黄绿素+氯化锰仅在发生LAMP反应时才出现翠绿色，避免了SYBR Green I和Gene Finder染料造成的假阳性问题，具有更好的特异性。

总之，本发明采用LAMP技术，特异性强，且比PCR检测方法有更高的灵敏度，但不需要昂贵的PCR仪，只需要普通的水浴锅即可，且结果不必用凝胶电泳来观察，简单而快速，特别适用于基层现场检测禽脑脊髓炎病毒。

技术转让，许可，合作所需资金需双方协商，此项技术想尽快落地，希望具备此项技术研发的技术方，能够尽快承接此项目。。