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一种鉴别8种鸡免疫抑制病病原体的GeXP快速检测试剂盒和检测方法

成果类型:: 发明专利

发布时间: 2024-04-24 09:53:15

科技成果产业化落地方案
方案提交机构:成果发布人| 涂媛 | 2024-04-24 09:53:15

本发明的目的是提供一种鉴定或辅助鉴定鸡免疫抑制病病原体的GeXP快速检测的试剂或试剂盒,含有如下八种PCR引物对:鉴定或辅助鉴定鸡马立克病病毒的PCR引物对A,鉴定或辅助鉴定A亚群禽白血病病毒的PCR引物对B ,鉴定或辅助鉴定B亚群禽白血病病毒的PCR引物对C,鉴定或辅助鉴定J亚群禽白血病病毒的PCR引物对D,鉴定或辅助鉴定禽网状内皮组织增生症病毒的PCR引物对E,鉴定或辅助鉴定鸡呼肠孤病毒的PCR引物对F、鉴定或辅助鉴定鸡传染性贫血病毒的PCR引物对G,鉴定或辅助鉴定传染性法氏囊炎病毒的PCR引物对H。

本发明公开了一种同时鉴别8种鸡传染性免疫抑制病病原体的GeXP快速检测试剂盒。该试剂盒是基于GeXP系统使用的,包含8种PCR引物对,用于同时鉴别检测鸡马立克氏病病毒、A、B和J亚群禽白血病病毒、禽网状内皮组织增生症病毒、禽呼肠孤病毒、禽传染性贫血病毒和传染性法氏囊炎病毒,特异性好,灵敏度高,均可检到100拷贝/μl,与病原体分离和血凝抑制实验或血清学实验等常规实验方法的鉴定结果相比,符合率达100%。本发明为常见的主要鸭传染性疾病病原体的检测提供了简便、高通量的检测试剂盒和检测体系,更符合实际的需要,应用前景广阔。

鸡马立克氏病病毒、A、B和J亚群禽白血病病毒、禽网状内皮组织增生症病毒、禽呼肠孤病毒、鸡传染性贫血病毒和传染性法氏囊炎病毒均为传染性的可导致鸡免疫抑制的病毒。鸡感染鸡马立克氏病病毒、A、B和J亚群禽白血病病毒和禽网状内皮组织增生症病毒后可引起病鸡发生肿瘤,且也可引起终身的免疫抑制。鸡感染禽呼肠孤病毒、鸡传染性贫血病毒和传染性法氏囊炎病毒后也能长时间的抑制鸡的免疫功能。鸡感染这些病毒以后,免疫功能受到抑制,注射疫苗后抗体产生迟缓,抗体水平低,容易继发感染其他细菌性疾病,鸡生长缓慢,是阻碍养鸡行业发展的重要因素。

鉴别诊断这些鸡免疫抑制病的传统方法,主要包括病原分离鉴定和血清学试验等,但这些方法常受临床病材料新鲜度、污染程度或病程等因素的限制,操作也十分繁琐、费时,对多重混合感染的鉴别诊断就更为困难。近年来,随着分子生物学的发展,PCR技术已被广泛应用于这些鸡传染病的检测,并建立了多重PCR检测技术,同时检测几种病原,但需几对引物组合在一起同时竞争的扩增,引物之间会产生相互干扰,多增加一对引物,敏感性就越低。PCR产物需通过琼脂糖电泳才可观察结果,该电泳难以区分50bp-100bp以内的条带,一般只可做到2-4重PCR,难以达到高通量的检测。多重荧光PCR一般只检测到3重,由于探针要标记不同发光波长的荧光基团,如标记太多的荧光基团,相互会产生干扰,因此,也只能检测到2-4重。由于在多重PCR反应体系中同时存在几对引物,使得形成复杂引物二聚体的概率大大增加,同时检测的目的基因数量有限(多在2-4个基因),使得多重PCR还达不到高通量快速检测和分析的目的。

谢芝勋(1963.1一),男,广西博白人。1983年毕业于广西农学院畜牧兽医系兽医专业。二级研究员,硕士研究生导师,现任广西壮族自治区兽医研究所副所长,国家“万人计划”领军人才、“新世纪百千万人才工程”国家级人选、享受国务院特殊津贴专家、广西特聘专家和广西优秀专家。主要从事动物传染病综合防控技术的研究,开展了一系列高水平科研项目的研究工作,先后主持了国家自然科学基金、国家科技成果转化项目、科技部、农业部、广西科技攻关重大专项和广西自然科学基金重点项目等30多个项目的研究,在动物传染病(包括禽病、猪病、牛病、虾病和贝类疾病等)防控技术的研发上取得一批具有国内领先和国际先进水平的科研成果,解决养殖业发展一系列技术关键问题,促进了行业技术进步,产生了显著经济效益和社会效益。

本发明提供了一种同时鉴别8种鸡传染性免疫抑制病病原体的GeXP快速检测试剂盒和检测方法。该试剂盒是基于GeXP系统使用的,包含8对PCR引物,检测结果表明,该试剂盒特异性强,灵敏度高,可以用于同时鉴别检测鸡马立克氏病病毒、A、B和J亚群禽白血病病毒、禽网状内皮组织增生症病毒、禽呼肠孤病毒、鸡传染性贫血病毒和传染性法氏囊炎病毒。

技术转让,许可,合作所需资金需双方协商,此项技术想尽快落地,希望具备此项技术研发的技术方,能够尽快承接此项目。。