包拉米虫LAMP检测试剂盒
成果类型:: 发明专利
发布时间: 2024-04-24 09:39:52
本发明公开了一种包拉米虫LAMP检测试剂盒。本发明提供了检测包拉米虫的环介导等温扩增引物组,包括引物1、引物2、引物3和引物4;所述引物1、所述引物2、所述引物3和所述引物4的核苷酸序列分别依次为序列表中的序列1、序列2、序列3和序列4。本发明的实验证明,本发明MDPV的保守序列设计了针对8个特异区域的6条引物,用其进行LAMP检测,具有比常规检测方法更特异、更敏感的特点,仅需使用一台能控温的水浴锅,并且结果可以无需仪器而仅通过肉眼判定,适合在基层兽医站和养殖场中进行快速检测,具有较好的应用前景。
具有比常规检测方法更特异、更敏感的特点,仅需使用一台能控温的水浴锅,并且结果可以无需仪器而仅通过肉眼判定,适合在基层兽医站和养殖场中进行快速检测,具有较好的应用前景。
包拉米虫(Bonamia)是影响世界贝类养殖业发展的主要病原,所有种类的贝类和其余贝类科的贝类都被认为有易感性,主要寄生在血淋巴细胞内,能造成较大的死亡率。包拉米虫病(Bonamiasis)因为包拉米虫的高致病性和广阔的地理分布,为OIE规定的必报水生动物疫病之一。
传统的检测方法,需要使用昂贵的仪器和试剂等。而环介导等温扩增技术(loop-mediated isothermal amplification,LAMP)是由Notomi等于2000年建立的一种新型核酸扩增技术,该技术具有操作简便、反应快速、成本低廉和结果可视化等优点,目前在一些病原微生物的检测中被广泛运用。
目前,国内外均未见有建立Bonamia LAMP可视化检测试剂盒和方法的相关报道。
谢芝勋(1963.1一),男,广西博白人。1983年毕业于广西农学院畜牧兽医系兽医专业。二级研究员,硕士研究生导师,现任广西壮族自治区兽医研究所副所长,国家“万人计划”领军人才、“新世纪百千万人才工程”国家级人选、享受国务院特殊津贴专家、广西特聘专家和广西优秀专家。主要从事动物传染病综合防控技术的研究,开展了一系列高水平科研项目的研究工作,先后主持了国家自然科学基金、国家科技成果转化项目、科技部、农业部、广西科技攻关重大专项和广西自然科学基金重点项目等30多个项目的研究,在动物传染病(包括禽病、猪病、牛病、虾病和贝类疾病等)防控技术的研发上取得一批具有国内领先和国际先进水平的科研成果,解决养殖业发展一系列技术关键问题,促进了行业技术进步,产生了显著经济效益和社会效益。
本发明的实验证明,本发明MDPV的保守序列设计了针对8个特异区域的6条引物,使扩增反应具有很高的特异性,在内引物之间增加两条环引物提高了扩增效率,缩短了LAMP的反应时间。通过优化反应条件后,建立了的LAMP检测方法。所建立的BonamiaLAMP检测方法只需要在62-64℃的水浴锅中反应50分钟即可完成,能特异的检测Bonamia,并且检测的灵敏度非常高,能检测到15.4fg的Bonamia DNA样品,灵敏度是常规PCR的10倍。总之,本发明的引物和方法,具有比常规检测方法更特异、更敏感的特点,仅需使用一台能控温的水浴锅,并且结果可以无需仪器而仅通过肉眼判定,适合在基层水产兽医站和养殖场中进行快速检测,具有较好的应用前景。
技术转让,许可,合作所需资金需双方协商,此项技术想尽快落地,希望具备此项技术研发的技术方,能够尽快承接此项目。。