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一种原位检测蛋白质与脱氧核糖核苷酸结合位置的方法

成果类型：: 发明专利

发布时间: 2023-10-30 15:58:35

科技成果产业化落地方案
方案提交机构：天津市滨海新区| 宋学姮 | 2023-11-08 16:48:26
成果简介 技术亮点 应用前景 团队概括 产生的效益 转化方式
本发明公开了一种原位检测蛋白质与脱氧核糖核苷酸结合位置的方法，包括构建表达胞嘧啶脱氧核苷酸脱氨酶‑目标蛋白融合蛋白的目标菌株，以及表达目标蛋白的对照菌株，所述目标菌株和对照菌株不含尿嘧啶DNA糖苷酶基因；诱导目标菌株和对照菌株的蛋白表达后，提取目标菌株和对照菌株的基因组DNA；对基因组DNA进行高通量测序，分析获得目标菌株和对照菌株的基因组DNA的点突变，剔除目标菌株和对照菌株共有的点突变后，从目标菌株的余下点突变中筛选处于非编码区的点突变，即得。该方法利用细菌中嘧啶脱氧核苷酸脱氨酶对DNA的突变能力，通过构建表达融合蛋白的目标菌株，之后只需简单的基因组测序即可得到最终结果，方便快捷。
一种原位检测蛋白质与脱氧核糖核苷酸结合位置的方法，其特征在于，包括： 1)构建表达胞嘧啶脱氧核苷酸脱氨酶-目标蛋白融合蛋白的目标菌株，以及表达目标蛋白的对照菌株； 所述目标菌株和对照菌株不含尿嘧啶DNA糖苷酶基因； 2)诱导目标菌株和对照菌株的蛋白表达后，提取目标菌株和对照菌株的基因组DNA； 3)对目标菌株和对照菌株的基因组DNA进行高通量测序，分析获得目标菌株和对照菌株的基因组DNA的点突变，剔除目标菌株和对照菌株共有的点突变后，从目标菌株的余下点突变中筛选处于非编码区的点突变，即为目标蛋白结合位点。

  1. 基因表达调控研究 ：该方法可以帮助科学家了解蛋白质与DNA之间的相互作用如何调控基因表达，从而深入研究生物学和分子医学中的相关过程。

  2. 疾病机制研究 ：用于研究与癌症、遗传疾病等相关的蛋白质-DNA相互作用，以识别潜在的治疗靶点或了解疾病机制。

  3. 药物筛选和研发 ：可以用于评估潜在药物对蛋白质与DNA相互作用的影响，以帮助药物研发和筛选。

  4. 分子生物学研究 ：用于深入探究蛋白质-DNA相互作用在细胞和分子水平上的重要性。

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  1. 蛋白水解物提取 ：从含有蛋白水解物的生物样本中提取蛋白水解物。这可以通过蛋白水解技术和提取方法来完成，确保蛋白水解物的纯度和活性。

  2. 靶向流感病毒筛选 ：对提取的蛋白水解物进行筛选，选择具有对流感病毒具有较高特异性和亲和力的水解产物。

  3. 优化和纯化 ：优化蛋白水解物的结构和功能，以提高其靶向流感病毒的效果。然后，通过适当的纯化技术，如层析和电泳等方法，获得高纯度的水解产物。

  4. 配制药剂 ：将纯化的蛋白水解产物与适宜的药剂配制成药物制剂，确保其在临床应用中的稳定性和安全性。

技术转让

这种蛋白水解靶向流感病毒的制备方法和应用有望为流感治疗领域提供一种新的治疗策略，为流感病毒的控制和治疗提供新的途径。