双歧杆菌作为一种典型的益生菌，广泛存在于人体肠道和母乳样品，但其在长寿老人粪便样品中的丰度显著低于婴儿粪便样本，加上严格厌氧的属性，使得长寿老人源双歧杆菌的分离培养极其困难，相关研究开发进展缓慢。本发明给出一种长寿老人源双歧杆菌分离鉴定的方法，属于微生物技术领域。采用的培养基是以TPY培养基为基础进行改良的选择性培养基。所述的改良TPY包括抗生素莫匹罗星、生物调控因子A、显色剂X‑Gal和生长调控因子B。本发明的改良TPY能选择性地抑制粪便样品中的革兰氏阴性菌，且对双歧杆菌的生长具有促进作用，使得其在平板表面生长出显蓝色的典型菌落，可显著降低复杂混合样品中双歧杆菌的分离难度，对双歧杆菌的筛选培养具有实用价值。

本发明提供了一种长寿老人源双歧杆菌分离鉴定的方法。一种长寿老人源双歧杆菌分离鉴定的方法，所述的分离鉴定方法采用的是平板稀释涂布法。 进一步的，所述的分离鉴定方法采用的是改良TPY选择性培养基。进一步的，所述的改良TPY配方包括抗生素莫匹罗星、生物调控因子A。莫匹罗星对革兰氏阳性球菌和革兰氏阴性菌抗菌活性较高，但大多数厌氧菌(如梭状芽孢杆菌)却对莫匹罗星具有抗性。经过反复筛选得到的生物调控因子A，对革兰氏阴性杆菌的抗菌活性高，且对肠杆菌科的大部分细菌具有较好的抗菌活性，如产气肠杆菌、产气荚膜梭菌和大肠埃希氏菌等。这两种添加物的共同点是对双歧杆菌的生长无抑制作用。

双歧杆菌是对人为在具有独特生理功能的厌氧微生物类群。一种长寿老人源双歧杆菌分离鉴定的方法，采用的是平板稀释涂布法。其鉴定方法采用的是改良tpy选择性培养基，所述的改良tpy配方包括抗生素莫匹罗星、生物调控因子a、显色剂x-gal、生长因子生长调控因子b。

双歧杆菌的应用也已发展到多个方面，如食品、药品、基因工程等。因此，一种长寿老人源双歧杆菌分离鉴定的方法具有广泛的应用前景。

广西大学坐落于素有“中国绿城”之称的广西首府南宁，是广西唯一的国家“211工程”建设学校，“双一流”建设高校，教育部和广西壮族自治区人民政府“部区合建”高校。广西大学1928年成立于梧州，1939年成为国立广西大学，首任校长是被誉为教育界“北蔡南马”和“一代宗师”的我国著名教育家、科学家、民主革命家马君武博士，李四光、陈望道、李达、陈寅恪、梁漱溟等一大批名家大师曾在这里任教。

与现有技术相比，此技术产生的效益如下：

 1、本发明的长寿老人源双歧杆菌分离鉴定的方法能够有效抑制粪便样品中的杂菌，莫匹罗星抑制革兰氏阳性球菌和革兰氏阴性菌，特别是能抑制一些同样能使X‑Gal显蓝色的乳酸菌。生物调控因子A抑制革兰氏阴性杆菌和大部分肠杆菌科，另外还包括莫匹罗星无法抑制的梭状芽孢杆菌和产气荚膜梭菌等，莫匹罗星和生物调节因子A的联合使用形成有效的互补作用，降低了粪便样品中双歧杆菌分离鉴定的难度，对双歧杆菌的分离鉴定和扩大培养具有重要意义。

2、采用本发明的筛选培养方法，可以使得不需采用富集培养基对双歧杆菌进行富集培养，而可以直接将粪便样品加入无菌PBS缓冲液进行梯度稀释，然后再进行平板涂布，在固体培养基的表面就能形成典型的菌落形态，并且在显色剂X‑Gal的作用下，通过挑选显蓝色的菌落进行后续鉴定，能有效提高双歧杆菌的分离鉴定成功率，具有快速准确、操作简单的特点，适用于双歧杆菌的特异性筛选。

技术转让，许可，合作所需资金需双方协商，此项技术想尽快落地保定，希望具备此项技术研发的技术方，能够尽快承接此项目。