科创中国
液相色谱-串联质谱检测奶中褪黑素的方法及其性能评价
成果类型：: 发明专利
发布时间: 2023-09-05 17:12:02
科技成果产业化落地方案
方案提交机构：“科创中国”畜牧产业科技服务团| 中国农村专业技术协会 | 2023-11-16 16:26:36
本发明公开了使用液相色谱‑串联质谱(LC‑MS/MS)法检测奶中褪黑素浓度的方法及检测性能评价，该方法可以排除干扰，更准确的检测奶中褪黑素浓度。本发明还包括对奶的前处理方法，采用甲醇提取样品后，使用C18固相萃取柱净化，可有效降低检测时产生的基质效应，使得检测更加准确，为奶中褪黑素的研究提供了有益的参考。
本发明的优点在于：(1)样本的前处理方法中，通过甲醇提取后，在‑18℃以下降温去除蛋白及部分脂肪更加彻底；(2)样本的前处理方法中，通过甲醇提取后，离心得到的上清液经过C18固相萃取柱净化，去除极性物质，降低基质效应，使得检测更加准确；(3)样本的前处理方法中，氮吹、复溶步骤，起到浓缩的作用，可以减少稀释倍数，增加浓度，例如可由开始的稀释5倍浓缩为稀释2倍，因此，也更有利于浓度较低样本的检测；(4)本发明的液相色谱‑串联质谱方法检测奶中褪黑素的含量，通过检测性能评价，该检测方法精确度高，灵敏度高，可靠性高。
本发明公开了使用液相色谱‑串联质谱(LC‑MS/MS)法检测奶中褪黑素浓度的方法及检测性能评价，该方法可以排除干扰，更准确的检测奶中褪黑素浓度。本发明还包括对奶的前处理方法，采用甲醇提取样品后，使用C18固相萃取柱净化，可有效降低检测时产生的基质效应，使得检测更加准确，为奶中褪黑素的研究提供了有益的参考。
刘国世团队首次证实线粒体是褪黑素（Melatonin，俗成“脑白金”，促进睡眠、调节繁殖）合成场所，揭示褪黑素促进排卵、黄体形成及维持、胚胎发育与附植、提高机体应激下抗炎症能力的作用机理；皮下注射褪黑素制剂，可将奶牛受胎率提高8个百分点，使奶中体细胞数下降40%左右，并通过调节线粒体自噬提高免疫力，减少乳房炎发生；口服褪黑素，猪胎产仔数提高0.8-1.2头。阐明褪黑素和α-酮戊二酸延缓生殖衰老的机理；培育高褪黑素牛羊育种新材料。主持建立《牛奶中 褪黑素含量的测定液相色谱—串联质谱法》团体标准,为高褪黑素功能牛奶的上市奠定基础。 建立高效冻精体系，猪和羊精液冷冻解冻活力达到0.5，人工授精受胎率接近鲜精水平。近十年来，组织开展优质种羊胚胎移植技术扩繁示范，累计超排供体420只，移植受体2401只次，妊娠率64.30%，产羔率67.61%；玻璃化冷冻胚胎，解冻后移植妊娠率达到55%。同时，开展羊内窥镜输精技术示范，累计示范输精母羊6843只次，妊娠率76.94%。曾作为骨干参加“牛羊胚胎工程产业化技术体系的研究”，首次进行国内万枚洲际羊胚胎移植，获教育部科技进步二等奖。
第一方面，本发明提供液相色谱‑串联质谱检测奶中褪黑素的前处理方法。第二方面，本发明提供液相色谱‑串联质谱检测奶中褪黑素的方法。本发明提供了使用液相色谱‑串联质谱(LC‑MS/MS)法测定奶中褪黑素浓度的方法及检测性能评价，该方法可以排除干扰，更准确的检测奶中褪黑素浓度。本发明还包括对奶的前处理方法，采用甲醇提取样品后，浓缩，使用C18固相萃取柱净化，去除极性大分子等干扰检测物质后，能够有效降低检测时产生的基质效应，并减少褪黑素的损失，使得检测更加准确，为奶中褪黑素的研究提供了有益的参考。
转化方式以技术许可和技术服务为主，具体金额以双方协商结果为准。本发明属于褪黑素检测技术领域，具体地涉及使用液相色谱‑串联质谱(LC‑MS/MS)方法测定奶中褪黑素浓度的方法及检测性能评价。可对有需求的企业及实验室开展技术服务。在本发明技术方案的基础上，未来可与合作伙伴共同研发在非实验室条件下，更方便快捷的，更高效、便利地用于实际生产工作。
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