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一种沙门氏菌工程穿膜噬菌体及其构建方法与应用
成果类型：: 发明专利
发布时间: 2023-09-05 15:54:40
科技成果产业化落地方案
方案提交机构：天津市滨海新区| 宋学姮 | 2023-09-14 09:32:46
本发明涉及生命科学技术领域，尤其涉及一种沙门氏菌工程穿膜噬菌体及其构建方法与应用。所述沙门氏菌工程穿膜噬菌体包括噬菌体和穿膜肽，所述噬菌体表面具有表面蛋白，所述表面蛋白与所述穿膜肽融合，所述表面蛋白为含有Ig‑like结构域的蛋白。本发明通过生物信息学方法在鼠伤寒沙门氏菌噬菌体的结构蛋白中高通量筛选出适用于与外源蛋白融合表达的蛋白，即含有Ig‑like结构域的蛋白，随后让鼠伤寒沙门氏菌噬菌体表面融合表达细胞穿膜肽，获得可以高效杀伤细胞内鼠伤寒沙门氏菌的工程噬菌体，提高鼠伤寒沙门氏菌噬菌体进入细胞的效价，将噬菌体疗法扩展到对细胞内感染的治疗。
1.一种沙门氏菌工程穿膜噬菌体，其特征在于，包括噬菌体和穿膜肽，所述噬菌体表面具有表面蛋白，所述表面蛋白与所述穿膜肽融合，所述表面蛋白为含有Ig-like结构域的蛋白。
2.根据权利要求1所述的一种沙门氏菌工程穿膜噬菌体，其特征在于，所述表面蛋白为GP94蛋白。
3.根据权利要求1所述的一种沙门氏菌工程穿膜噬菌体，其特征在于，所述穿膜肽包括HA-TAT、cTAT、Intergrin、R8、R7、P8和Transportan中的一种。
鼠伤寒沙门氏菌作为第二大食源性感染致病菌，每年可引起约20万人死亡。其中鼠伤寒沙门氏菌致病机制主要涉及其可感染肠上皮细胞，并首先在细胞内形成包含沙门菌的囊泡后期可逃离至细胞质内进行大量繁殖，导致潜在的感染灶，造成感染的迁延不愈。此外鼠伤寒沙门氏菌除可入侵上皮细胞还可以感染吞噬细胞甚至成纤维细胞等。抗生素作为有效的治疗手段，随着其广泛使用，高耐药性鼠伤寒沙门氏菌出现并开始全球传播，并且由于细胞膜存在，抗生素难以渗透到细胞内达到有效的作用浓度，为胞内菌的有效杀伤带来极大的难度，所以临床上迫切需要寻找新的有效治疗鼠伤寒沙门氏菌感染的替代方式。
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本发明通过在鼠伤寒沙门氏菌噬菌体结构蛋白中筛选出适用于与外源蛋白融合表达的蛋白，然后让噬菌体表面融合表达细胞穿膜肽，获得可以高效杀伤细胞内鼠伤寒沙门氏菌的工程穿膜噬菌体，为治疗细胞内感染鼠伤寒沙门氏菌提供新思路。
有益效果：
本发明通过生物信息学方法高通量筛选噬菌体表面蛋白，可以快速高效获得靶标蛋白，扩展噬菌体展示技术的应用范围；进一步，通过在筛选出的噬菌体表面蛋白融合表达细胞穿膜肽，提高噬菌体进入哺乳动物细胞的效价，将噬菌体疗法扩展到对胞内菌感染的治疗，为治疗细胞内感染鼠伤寒沙门氏菌提供新思路。
技术合作
综上所述，本发明提供的一种沙门氏菌工程穿膜噬菌体及其构建方法与应用，通过生物信息学方法高通量筛选噬菌体表面蛋白，可以快速高效获得靶标蛋白，扩展噬菌体展示技术的应用范围；进一步，通过在筛选出的噬菌体表面蛋白融合表达细胞穿膜肽，提高噬菌体进入哺乳动物细胞的效价，将噬菌体疗法扩展到对胞内菌感染的治疗。
应当理解的是，本发明的应用不限于上述的举例，对本领域普通技术人员来说，可以根据上述说明加以改进或变换，所有这些改进和变换都应属于本发明所附权利要求的保护范围。
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