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αs1- 酪蛋白的抗原表位制备得到的单抗及牛乳过敏原检测方法

成果类型:: 新技术

发布时间: 2023-07-27 10:24:02

科技成果产业化落地方案
方案提交机构:成果发布人| 柯燕萍 | 2023-07-27 10:24:02

牛乳蛋白质含量高而且易吸收,但是其中的过敏原严重影响了婴幼儿的身体健康。目前国内外对牛乳过敏性疾病没有彻底有效的根治方法,防止牛乳过敏的主要有效手段是避免食入含有乳过敏原的食物。因此建立精确、快速的过敏原残留量的检测方法具有重要的意义。利用本发明的 αs1- 酪蛋白的抗原表位,制备的单克隆抗体,优于 αs1- 酪蛋白全蛋白作抗原获得的单克隆抗体。通过间接竞争 ELISA 方法检测 αs1- 酪蛋白为抗原,本发明的 αs1- 酪蛋白的抗原表位制备的单克隆抗体其检出限低于为 10.49ng/mL,而 αs1- 酪蛋白全蛋白的单抗作为一抗时,检出限60.50ng/mL,前者的检测限具有明显的优势。此外,本发明的 αs1- 酪蛋白的抗原表位制备的单克隆抗体的最适工作浓度为稀释 10000 倍,而 αs1- 酪蛋白全蛋白的单抗最适工作浓度则为稀释 5000 倍,同时以其建立的间接竞争 ELISA 方法的精确性和重复性也更优异。同时经过验证,本发明的单克隆抗体建议的方法精确性、重复性较好,能够有效的用于检测牛乳过敏原,具有推广应用价值。

虽然 ELISA 方法灵敏性高、特异性强、快速、费用低,因而在过敏原检测中得到了广泛的应用,特别适用于食物中少量过敏原检测。但这种方法也有其局限性,对于存在交叉过敏反应的过敏原,即对于存在相似作用表位的过敏原间,ELISA 方法常出现假阳性,因此制备出高特异性抗体对 ELISA 方法检测牛乳中过敏原十分重要。同时在应用免疫学方法检测方面,抗体的质量与反应模式也是影响检测结果的关键因素。应用此种方法时,需要获得高质量的抗体,选取合适的反应模式和有效的提取过敏原方法。在食品领域,抗体的制备多是用全蛋白来作为抗原,这样就会造成制备的抗体特异性不强,精确度不高。事实上,目前针对牛乳酪蛋白中其他致敏蛋白建立的间接竞争 ELISA 方法报道较多,但是针对 αs1- 酪蛋白作用表位建立的间接竞争 ELISA 方法报道较少

本项目在牛乳过敏相关领域具有广阔的应用前景,可应用于食品行业、临床医学、食品科学研究、遗传学研究以及药物开发等领域。

本项目团队主要研究领域:食物过敏原致敏机理及脱敏技术研究,功能性食品的开发,食品风味成分分析。主要学术成果(课题、论文、获奖、专利等),承担多项科研项目和发表多篇代表性的论文。

该技术成果项目可以检测牛乳中的αs1-酪蛋白,识别潜在的过敏原,并对牛奶产品进行质量控制和安全监测。通过该技术检测血清或体液中的αs1-酪蛋白抗原,可以确定是否存在牛乳过敏,并评估过敏程度。进了我们对牛乳过敏的认识和理解。

总之,该技术成果能产生牛奶产品安全性保障、个体化诊断与治疗、牛乳过敏预防与管理、遗传研究与基因筛查以及食品行业监管与标准制定等方面的效益。它有助于提高牛乳过敏的诊断和预防能力,促进相关领域的发展和创新,并改善过敏人群的生活质量和健康状况。

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