科创中国
甜菜胚珠切割透明制片方法
成果类型：: 发明专利
发布时间: 2023-07-27 09:06:01
科技成果产业化落地方案
方案提交机构：“科创中国”黑龙江科技服务团| 孙富民 | 2023-11-03 11:03:32
甜菜胚珠切割透明制片方法，涉及一种胚珠切割透明制片方法。本发明是要解决现有观察甜菜胚囊的方法处理量大，费时、费力的问题。方法：一、取样及固定；二、整体染色；三、用解离液解离，再用蒸馏水冲洗；四、把解离后的甜菜花蕾放置在培养皿内，用解剖针在解剖镜下将胚珠从子房中分离出来，在距胚珠珠孔端1/3处对胚珠进行切割；五、将分离切割后留下的株孔端1/3部分放在载玻片上，滴透明剂，再滴硼砂洋红染色液，静置；六、制片。该方法快速省时，极大的减少了工作量，实验效果良好，成本低，易于操作。本发明方法用于观察甜菜胚囊。
（1）本发明方法是利用解剖镜直接剥离胚囊分离胚珠，并将分离出来的胚珠进行再次切割，只保留珠孔端一小部分进行制片，胚珠其余大部分被废弃掉，大大减少了视野下胚珠体细胞的数量，增加了观察大孢子母细胞的准确度，极大的减少了工作量，更易于找到大孢子母细胞。
（2）本发明的方法简便易行，不用太多仪器设备，解剖镜和普通光学显微镜即可进行分离和观察。
（3）本发明的方法所用的解离液比酶解法用的果胶酶、纤维素酶成本低得多，盐酸、酒精1:1即可达到解离目的，且解离效果好，有效降低了实验成本。
（4）本发明方法的效果好，易于操作和掌握，降低了制片难度，提高了工作效率，省时省力。
为满足单体柱使用单位的要求。针对使用单位提出的问题进行分析研究，做了如下技术改造：
1、针对油缸底部出现的喇叭口现象进行分析，油缸与底座的连接钢丝处是整体单体柱耐压薄弱处，将底座加高来增加底部的抗压强度。改造一年多来没有出现相同现象的发生。
2、单体液压支柱发生倒柱现象，多数由于内部活塞下泄漏造成。老生产工艺的活塞上装有Y型密封圈，皮琬防挤圈、活塞导向环、O型密封圈、活塞防挤圈，通过活塞连接钢丝和活柱体连接。活塞起活柱导向和油缸密封作用，如果O型密封圈失效，就会造成内部泄漏，容易倒柱伤人，连接钢丝容易划伤油缸内壁，造成单体柱的报废。
采用传统单体柱生产工艺－－活柱筒与活塞分离，由于加工工序复杂，不但容易出现产品质量问题，而且生产成本高。将单体柱由过去分离组装式改为一体式
活塞一体柱的优点：一是不用组装联接，减少一道密封，从而消除一个可能的泄漏点，进一步提高产品使用寿命，二是没有连接钢丝，不会有连接钢丝划伤油缸的现象，三是由于对活塞减少了加工工序，降低了劳动强度，减少了成本支出。每根单体柱节约成本15元左右。
采用传统单体柱生产工艺－活柱筒与活塞分离，由于加工工序复杂，不但容易出现产品质量问题，而且生产成本高，将单体柱由过去分离组装式改为一体式。
活塞一体柱是在活柱筒的活塞部位切槽进行堆焊，达到要求
黑龙江大学（Heilongjiang University），位于黑龙江省哈尔滨市，是黑龙江省人民政府和中华人民共和国教育部、国家国防科技工业局共建的省属综合性大学，黑龙江省“双一流”建设国内一流大学A类高校，入选国家卓越法律人才教育培养计划、中西部高校基础能力建设工程、特色重点学科项目、国家建设高水平大学公派研究生项目、中国政府奖学金来华留学生接收院校、全国深化创新创业教育改革示范高校、教育部来华留学示范基地，是世界翻译教育联盟、中俄新闻教育高校联盟、中俄综合性大学联盟、上海合作组织大学、“一带一路”智库合作联盟成员单位。
研究对象为2014年01月-2015 年06月在我院眼科确诊并手术治疗的严重 PDR 患者46例（50 眼）。其中男 25例，女21 例。年龄 30-78 岁，平均年龄（56.33±7.82）岁。所有患者均有糖尿病史，经视力、裂隙灯、直接及间接眼底镜、B超、眼底荧光血管造影（FFA）示不同程度存在玻璃体腔积血、视网膜增殖性改变或视网膜脱离等严重PDR。排除曾接受过玻璃体腔注射或接受过玻璃体切割术治疗者、青光眼以及患有可能影响视力的其他眼部疾病的患者及凝血功能指标异常者，无一般手术禁忌症。随机分为两组，药物辅助手术组19例22眼，男 10例12眼，女9例10眼，术前3 -7 d行玻璃体腔玻璃体腔注射10 mg/ml康柏西普0.05 ml(含Conbercept 0.5 mg)；单纯手术对照组，27例28眼，男14例15眼，女13例 13眼，常规行23G微创玻璃体切割术。所有患者复诊时行视力、眼压、裂隙灯、间接眼底镜、B超等检查，记录术后视力、手术时间、 医源性裂孔发生率，术中电凝使用、术中及术后出血情况。随访时间为12m。本研究提示在23G微创玻璃体切割术前应用康柏西普眼内注射对增殖性糖尿病视网膜病变的疗效较好，可以明显简化手术过程，缩短手术时间，减少术中电凝使用次数及医源性视网膜裂孔、 术中出血和术后出血发生率，并且较单纯玻切手术患者术后视力有明显改善，提高了PDR手术的安全性。
技术转让、合同、入股均可，具体资金双方协商，希望尽快落地实现产业化。
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