科创中国
绝对定量方法、装置、计算机设备和存储介质
成果类型：: 发明专利
发布时间: 2023-05-16 17:03:44
科技成果产业化落地方案
方案提交机构：天津市滨海新区| 宋学姮 | 2023-05-18 09:26:03
本申请涉及一种绝对定量方法、装置、计算机设备和存储介质。所述方法包括：获取多个第一预设分子数；根据多个第一预设分子数和多个第二预设分子数中每个第二预设分子数对应的分区数量处理得到包含多个第一预设分子数和分子总数变量的函数；根据包含多个第一预设分子数和分子总数变量的函数处理得到分子总数变量的取值。采用本申请的方案能够提高绝对定量的准确性。
1.一种基于核酸分子的绝对定量方法，所述方法包括：获取设定的多个第一预设分子数；根据所述第一预设分子数获得多个第一预设分子数中每个第一预设分子数对应的包含分子总数变量的期望值函数；根据每个所述第一预设分子数所对应的期望值函数和对应的多个第二预设分子数中每个第二预设分子数对应的分区数量之间的差函数，得到包含所述多个第一预设分子数和分子总数变量的拟合函数；所述第一预设分子数为所述期望值函数中预设的分子数值；所述第二预设分子数为分区数量统计时预设的分子数值；在所述差函数的计算中，所述第一预设分子数和对应的所述第二预设分子数的取值相同；当所述包含所述多个第一预设分子数和分子总数变量的拟合函数取得最小值时，得到所述分子总数变量的取值；所述分子总数变量的取值用于表征核酸分子的总数量。
随着分子生物学技术的发展，出现了dPCR(Digital Polymerase ChainReaction，数字多聚酶链式反应)技术，它是一种核酸分子绝对定量技术。dPCR是一种常规聚合酶链反应方法的生物技术改进，可用于包括DNA，cDNA或RNA等克隆扩增核酸链的直接绝对定量。传统的dPCR绝对定量方法通过将一个样本体系分成几百、几万甚至上千万份，分配到不同的反应分区，每个分区包含0或1个拷贝的目标分子，在每个反应分区中分别对目标分子进行PCR扩增，扩增结束后对各个反应分区的荧光信号进行统计学分析，从而计算出溶液中的核酸分子数。然而目前的绝对定量方法，容易出现随机误差而导致绝对定量结果不准确。
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上述绝对定量方法、装置、计算机设备和存储介质，通过获取多个预设分子数，并根据多个第一预设分子数和多个第二预设分子数中每个第二预设分子数对应的分区数量处理得到包含第一预设分子数和分子总数变量的函数，根据包含多个第一预设分子数和分子总数变量的函数处理得到分子总数变量的取值，能得到多个第一预设分子数和分子总数之间的关系，且能得到较多的分子数对应的信息，例如各分子数对应的分区数量等，避免因仅用0和1计算分子数而导致的随机误差，使绝对定量结果更加准确。
技术合作
以上所述实施例仅表达了本申请的几种实施方式，其描述较为具体和详细，但并不能因此而理解为对发明专利范围的限制。应当指出的是，对于本领域的普通技术人员来说，在不脱离本申请构思的前提下，还可以做出若干变形和改进，这些都属于本申请的保护范围。因此，本申请专利的保护范围应以所附权利要求为准。
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