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血液中循环癌细胞的检测信号放大的方法与试剂盒
成果类型：: 发明专利
发布时间: 2023-05-12 09:41:52
科技成果产业化落地方案
方案提交机构：天津市滨海新区| 宋学姮 | 2023-05-18 11:13:42
本发明提供了一种信号放大检测血液中循环癌细胞的试剂盒和方法、以及人乳腺癌细胞的检测试剂盒，所述信号放大检测血液中循环癌细胞的试剂盒包括有：偶联循环癌细胞上抗原的特异性抗体1的探针A；偶联循环癌细胞上抗原的特异性抗体2的探针B;c）连接探针A和探针B的连接子。该试剂盒基于连接酶激活型探针，通过对CTCs的检测信号放大，可实现对血液中循环癌细胞的高灵敏度和高特异性的检测。
1.一种人乳腺癌细胞的检测信号放大试剂盒，其特征是，包括有：a)偶联抗体Trastuzumab抗体的探针A，所述探针A的碱基组成如SEQ ID NO.1所示,b)偶联单链抗体Anti-HER2-scFv的探针B,所述探针B的碱基组成如SEQ ID NO.2所示，c)碱基组成如SEQ ID NO.3所示的连接子。
肿瘤转移是导致肿瘤复发和难以根治的重要原因。而肿瘤的微转移 (micrometastasis)是指少数具有转移潜能的肿瘤细胞脱离原发灶，转移到血液、淋巴结、 骨髓或远处器官中。目前临床的检测手段很难发现这种微转移。相关研究表明，在癌症发展 的早期，已有微转移发生。循环癌细胞(circulating tumor cells，CTCs)是自发或因诊疗 操作，由实体瘤或转移病灶释放进入外周血循环的肿瘤细胞，是恶性肿瘤患者出现术后复 发或远处转移的重要标志。CTCs的早期检测有助于早期发现肿瘤的微转移、监测术后复发、 评估疗效及预后或选择合适的个体化治疗。
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本发明设计了一种连接酶激活型探针放大CTCs检测信号的方法。连接酶激活型探 针检测CTCs的最大优点在于它同时具备了实时定量PCR的高灵敏度和抗原抗体反应的高特 异性。它将对细胞的抗原的检测转变为对能进行指数扩增的DNA的检测，因此具有极高的检 测灵敏度，而邻近连接反应的苛刻条件(双探针必须同时结合到靶标抗原上，且相互间距离 足够贴近时，连接反应才能够发生)使得这种方法具有比普通PCR方法更高的特异性。
技术合作
以上所述实施例仅表达了本发明的几种实施方式，其描述较为具体和详细，但并 不能因此而理解为对本发明专利范围的限制。应当指出的是，对于本领域的普通技术人员 来说，在不脱离本发明构思的前提下，还可以做出若干变形和改进，这些都属于本发明的保 护范围。因此，本发明专利的保护范围应以所附权利要求为准。
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