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动物器官人源化的方法及人-动物嵌合体模型
成果类型：: 发明专利
发布时间: 2023-05-10 14:53:20
科技成果产业化落地方案
方案提交机构：天津市滨海新区| 宋学姮 | 2023-05-18 11:23:21
本发明涉及一种动物器官人源化的方法，其通过使用高效的DTA作为毒性基因产物，构建DTA‑Cre双转基因动物，植入该双转基因动物体内的人体干细胞，可以发育成人的体细胞，部分或完全替代动物体内原内脏或血液，达到人体细胞部分或完全替代动物体内目标脏器或血液的效果，并且通过使用四环素调控系统调控，可以严密控制毒性DTA的表达。通过上述方法构建的人‑动物嵌合体代替传统的转基因小鼠，操作简便。此外，本发明还涉及一种使用上述动物器官人源化的方法构建得到的人‑动物嵌合体模型。
1.一种动物器官人源化的方法，其特征在于，包括如下步骤：构建含有DTA基因的转基因动物以及含有Cre基因的转基因动物，其中，所述含有DTA基因的转基因动物的启动子与DTA基因被两个LoxP和一个停止序列隔开，由所述LoxP加上所述停止序列抑制表达，所述含有Cre基因的转基因动物的Cre基因的启动子由转入动物体内特异性启动子启动的四环素依赖的反式作用子启动；将所述含有DTA基因的转基因动物与所述含有Cre基因的转基因动物杂交，并对杂交后代进行基因筛选得到含有Cre基因及DTA基因的双转基因动物；向所述含有Cre基因及DTA基因的双转基因动物体内植入人体干细胞，制得含有人体细胞的双转基因动物；对含有人体细胞的双转基因动物喂食或注射四环素或四环素衍生物，诱导表达Cre，从而介导两个Loxp位点的重组，移除所述停止序列，DTA基因的启动子接近并启动表达DTA基因，杀死动物体内目标细胞，促进人源性细胞的增生，得到人-动物嵌合体模型。
乙型肝炎病毒(Hepatitis B virus，HBV)属于嗜肝病毒科，嗜肝病毒都有较强的 种属特异性和组织特异性。例如人类乙肝病毒的自然宿主只有人类和少数非人灵长类动物 (如黑猩猩），通常只侵犯宿主的肝脏组织。医学实验中最常用的实验动物小鼠因其肝脏无 法感染HBV而限制了在这一研宄领域的使用。而人与动物嵌合肝脏模型正好能够解决这一 难题，因为这种模型动物可以在自然情况下感染HBV。除用于HBV研究，这一模型还可以精确 地测量抗HBV载体的效能。除应用于HBV的研究，人和动物的嵌合肝脏还可以应用于其他很 多方面，包括人类肝细胞的生产和人工肝移植等。
中国科学院深圳先进技术研究院提升了粤港地区及我国先进制造业和现代服务业的自主创新能力，推动我国自主知识产权新工业的建立，成为国际一流的工业研究院。 深圳先进院目前已初步构建了以科研为主的集科研、教育、产业、资本为一体的微型协同创新生态系统，由九个研究平台，国科大深圳先进技术学院，多个特色产业育成基地、多支产业发展基金、多个具有独立法人资质的新型专业科研机构等组成。开展先进技术研究，促进科技发展。信息、电子、通讯技术研究新材料、新能源技术研究高性能计算、自动化、精密机械研究生物医学与医疗仪器研究相关学历教育、博士后培养与学术交流。
种由上述任一实施例所述的动物器官人源化的方法构建的人-动物嵌合体。 [0017]上述动物器官人源化的方法构建得到的人-动物嵌合体模型使用高效的DTA (白喉 毒素)作为毒性基因产物，构建DTA-Cre双转基因动物，植入该双转基因动物体内的人体干 细胞，可以发育成人的体细胞，部分或完全替代动物体内原内脏或血液，达到人体细胞部分 或完全替代动物体内目标脏器或血液的效果，并且通过使用四环素调控系统调控，可以严 密控制毒性DTA的表达。通过上述方法构建的人-动物嵌合体代替传统的转基因小鼠，操作 简便。
技术合作
以上所述实施例仅表达了本发明的几种实施方式，其描述较为具体和详细，但并 不能因此而理解为对本发明专利范围的限制。应当指出的是，对于本领域的普通技术人员 来说，在不脱离本发明构思的前提下，还可以做出若干变形和改进，这些都属于本发明的保 护范围。因此，本发明专利的保护范围应以所附权利要求为准。
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