本技术公开了一种定量检测单个原生质体和液泡内Cd2+的方法，属于植物生理毒理技术领域。本发明所述定量检测单个原生质体和液泡内Cd2+的方法，包括如下步骤：(1)在待测原生质体或者液泡悬液中加入LeadmiumTM Green AM探针溶液，孵育，洗净，得到待测悬液；(2)将步骤(1)得到的待测悬液进行荧光图像的拍摄，得到悬液中单个原生质体或者液泡的总荧光强度；(3)将步骤(2)得到的总荧光强度带入原生质体或液泡的标准曲线中，得到单个待测原生质体或单个液泡中Cd2+的含量(质量)。利用该方法可以精确检测每一个龙葵叶片原生质体或液泡中Cd2+的含量，且准确率达到95％以上。

关于镉吸收和转运已经有从根到茎、叶，从组织到细胞和基因范围的研究，主要集中在拟南芥(Arabidopsis thaliana)、天蓝歇菜(Thlaspicaerulescens)、东南景天(SedumalfrediiHance)等Cd的超积累品种中。迄今为止的研究表明，重金属Cd转移到地上后会以一个不损害重要的细胞器和参与细胞生命活动的细胞溶质的方式储存，也就是储存在液泡中。这种解毒机制称为液泡区室化，是超积累植物的一种重要的解毒机制。[0004]然而目前对液泡区室化的过程了解并不透彻，因此，有必要从细胞甚至液泡水平更好地了解Cd的积累、运输和内部反应，从而为植物液泡区室化对Cd吸收和植物维持体内稳态的贡献提供见解。目前关于植物中Cd的检测都是检测总的镉含量，并未有文献公开使用线性标准曲线定量检测Cd2+，特别是单个原生质体中或者单个液泡中Cd2+的含量。为了解决上述至少一个问题，本技术采用了高选择性、低检出限的荧光探针LeadiumTM GreenAM和Cd2+相结合，通过荧光强度和Cd2+含量的对应关系，实现了原生质体和液泡内Cd2+的含量的检测。这是对单个原生质体或液泡中Cd2+。

该项技术在待测原生质体或者液泡悬液中加入LeadmiumTM Green AM探针溶液，通过检查该溶液中单个原生质体或者液泡的总荧光强度，构建标准曲线，能够对原生质体或单个液泡中Cd2+的含量进行定量检测。

超积累植物具有极高的重金属积累水平，受到Cd胁迫的植物会有一系列的解毒机制来应对，以维持植物生理稳态。通过上述丰富能够对单个原生质体或当个液泡中镉离子进行定量检测，能够有助于隔离子在一些天然经济作物中的积累、运输和内部反应提供研究帮助，为超积累植物的一种重要的解毒机制寻找应用办法提供帮助，具有在相关实验室、科研院所以及企业研发部门中的应用价值，应用前景广泛。

江南大学是教育部直属、国家“211工程”重点建设高校和“双一流”建设高校。在教育部组织的第四轮全国一级学科评估中，学校“轻工技术与工程”“食品科学与工程”位列A+档，“设计学”位列A-档；在2022年“软科世界一流学科排名”中，学校15个学科入选，食品科学与工程学科连续四年蝉联世界第一；在ESI全球影响评价排行榜上，学校农业科学、工程学、化学、生物学与生物化学、材料科学、临床医学、计算机科学、药理学与毒理学、环境与生态学9个学科进入全球前1%；学校位居ESI综合排行中国大陆第55名；在中国管理科学研究院编制的《2022中国大学评价》中，位居全国第45名。学校是全国教育系统先进集体、江苏省文明单位、江苏省平安校园。

该科技成果领头人具有教授职称，在本领域均属于权威人士，并且其研究团队，经验丰富，分工明确。

该项成果属于引进消化吸收再创新设计，项目投入时间短，材料采购成本与生产成本均可控，投入资金量小，但在产品化商业化方面已经实现规模销售。

为了研发该技术成果目前已经投入各类经费15万余元，已经取得了实际的应用前景收益，针对尚需完善的技术，预期需要再投入经费的金额5万元，以便在1年时间内完善该技术。

该技术利用LeadmiumTM Green AM探针对原生质体和液泡进行标记，能够利用其标记的荧光强度进行检测，实现定量分析，选择性高，能够有助于隔离子在一些天然经济作物中的积累、运输和内部反应提供研究帮助，为超积累植物的一种重要的解毒机制寻找应用办法提供帮助，具有在相关实验室、科研院所以及企业研发部门中的应用价值，可产生一定的市场和经济效益。

该技术在落地转化过程中可以以技术转让的方式与相关单位、人员合作。技术转让金30万。

该项技术可转让对象主要包括但不限于：实验室、科研院所以及企业研发耗材研发及生产公司等。该项技术转让后其所有权既属于获得该技术的公司所有。