科创中国
植物乳杆菌AR113的肠道定植受其粘蛋白和肠道环境的影响
成果类型：: 著作权
发布时间: 2022-10-30 12:39:14
科技成果产业化落地方案
方案提交机构：成果发布人| CIFST-但晓雅 | 2022-10-30 12:39:14
植物乳杆菌Lactiplantibacillus plantarum是益生菌家族的重要成员，宿主菌的定殖是其持续发挥益生菌功能的关键。 ***肠道定植的机理至今尚未阐明，一个重要原因是定植过程受多种因素的影响。 本研究利用CRISPR/Cas9基因编辑技术构建植物***113粘蛋白基因敲除片段，并用聚乙二醇减少肠道菌群数量，以确定粘附能力和寄主肠道环境对植物L.植物肠道定植的影响。 植物 ***粘蛋白基因的敲除几乎没有改变该菌株对酸和胆盐的耐受性。 AR113ΔLP1431ΔLP22233ΔLP2792对HT-29细胞的粘附数由每100个细胞175个减少到114个。 体内定植实验发现，喂食小鼠后第1天，AR113和AR113ΔLP1431、2233和2792的荧光强度增加，而LP1431、LP2233和LP2792基因的缺失使小鼠肠道定植时间从14天缩短到11天。 用5-（6）-羧荧光素二醋酸酯N-琥珀酰亚胺酯标记。
结果表明，荧光强度的变化与胶粘剂的数量密切相关。 最后，与对照组相比，Ar113ΔLP1431ΔLP22233ΔLP2792的肠定植时间延长，小鼠肠道菌群丰度增加，十二指肠、空肠、回肠和结肠的菌群丰度增加。 总之， ***的肠道环境和黏附能力都影响着***的肠道定植，寄主的肠道遗传背景可能是***肠道定植的关键因素。
本研究旨在探讨 *** 粘附能力和寄主环境对其肠道定植的影响。 利用本课题组成熟的CRISPRCas9基因编辑技术，敲除了 ***基因组中的7个粘蛋白基因，并对RFP基因进行了标记。 对野生型和敲除型菌株的耐酸性和胆盐性、表面特性（疏水性、自聚集性和共聚集性）以及与HT-29细胞的粘附性进行了评价。 重要的是，我们进一步研究了AR113在体内的定植能力，并用CFDA-SE标记法检测AR113在肠道的分布和分布。
团队主要围绕食品微生物选育及功能评价、食品微生物制备关键技术以 及发酵食品研究与开发等三大研究方向积极展开工作。主要包括优质食品微生物(乳酸菌、酵母菌等)菌种资 源库的建立、定向育种以及功能评价;食品微生物高密度发酵技术、高活性高冷冻干燥制备技术等研发;优良 食品微生物在乳制品、豆制品、功能性食品等发酵食品应用关键技术研发。
团队主要围绕食品微生物选育及功能评价、食品微生物制备关键技术以 及发酵食品研究与开发等三大研究方向积极展开工作。主要包括优质食品微生物(乳酸菌、酵母菌等)菌种资 源库的建立、定向育种以及功能评价;食品微生物高密度发酵技术、高活性高冷冻干燥制备技术等研发;优良 食品微生物在乳制品、豆制品、功能性食品等发酵食品应用关键技术研发。
通过双方协商的方式进行成果转化，企业提供一定的资金支持用于科研，研究团队进行进一步的研究，以期将研究成果尽快投入工业化生产，从而产生更多的、更有利于人们生活的价值成果。
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