本发明公开了一种乙型肝炎病毒基因分型的方法，涉及病毒分类。该方法基于MASA液相芯片技术对乙肝病毒基因进行分型，主要根据乙肝病毒八种基因型的特点设计基因型特异的引物及探针，通过两轮PCR，分子杂交，再用Luminex仪器进行检测，根据检测值的大小来确定乙肝病毒属于八种基因型的哪一种。对病人体内的乙肝病毒进行基因分型，将有利于对疾病的进程进行预测，也可用于研究乙肝病毒的进化与发展。与现有技术相比，本发明具有：操作简单，特异性高，假阳性少，灵敏度高，结果明确，对目前已知的所有8种基因型乙肝病毒都可进行明确的区分，且费用较低，适合大范围的推广应用。

本发明的目的是，提供一种乙型肝炎病毒基因分型的方法。该方法基于MASA液相芯片技术对乙肝病毒基因进行分型，主要根据乙肝病毒八种基因型的特点设计基因型特异的引物及探针，通过两轮PCR，分子杂交，再用Luminex仪器进行检测，从而确定乙肝病毒属于八种基因型的哪一种。本发明的优点是：操作简单、结果明确、假阳性少、费用较低，适合大范围的推广应用。

乙型肝炎病毒(HBV)简称乙肝病毒，是一种DNA病毒，属于嗜肝DNA病毒科。根据目前所知，乙肝病毒只对人和猩猩有易感性，引发乙型病毒性肝炎疾病。完整的乙肝病毒成颗粒状，直径为42纳米，是英国科学家Dane于1970年首先发现，故又称Dane颗粒(丹氏颗粒)。Dane颗粒由外膜和内核两部分组成，外膜厚7纳米，由蛋白质和膜脂质组成，称作乙肝病毒表面抗原(HBsAg)。中心部分的直径约28纳米，为病毒的核心，其中包括核心抗原(HBcAg)，病毒基因组DNA和合成病毒基因组的DNA多聚酶。

乙肝病毒感染是一个严重的公共卫生问题。全球60亿人口中，约20亿人曾感染过乙肝病毒，其中3.5～4亿人为慢性乙肝病毒感染，约占全球人口6％。在这3.5～4亿慢性乙肝病毒感染者中，约15％～25％最终将死于与乙肝病毒感染相关的肝病。而我国属于高流行区，根据2002年全国乙型肝炎血清流行病学调查表明，我国一般人群中HBsAg流行率为9.09％，估计约1.2～1.3亿人为慢性乙肝病毒感染，占全世界慢性乙肝病毒感染者的1/3，全国每年死于与乙肝相关肝病约30万例。

根据研究，不同的基因型将导致不同的临床结果。例如在亚洲，乙肝病毒基因型以B和C为主，大量的研究发现，严重肝病的发生与基因型C的关系比基因型B的关系更密切。因此，对病人体内的乙肝病毒进行基因分型，将有利于对疾病的进程进行预测。此外，大范围的对乙肝病毒进行基因分型，可以用于研究乙肝病毒的进化与发展。

MASA液相芯片(Multi-Analyte Suspension Array，多功能悬浮点阵仪)技术是美国纳斯达克市公司上研制出的新一代生物芯片技术平台。它是一个非常灵活的多功能技术平台。其关键是把微小的乳胶颗粒(Beads，微球)分别染成不同的荧光色，然后再把针对不同检测物的核酸或蛋白以共价方式结合到给定颜色的微球上。应用时，先把针对不同检测物的、用不同颜色编码的微球混合，再加入被检测物(被检测物可以是血清中的抗原、抗体、或酶等，也可以时PCR产物)。在悬液中的微球与被检测物特异性地结合，并加上荧光标记。然后，微球成单列通过两束激光，一束判定微球的颜色从而决定被测物的特异性(定性)；另一束测定微球上的荧光标记强度从而决定被测物的量(定量)。所得的数据经电脑处理后可以直接用来判断结果。

依托北京大学第一医院感染科，由保定市人民医院（原保定市传染病医院）肝病科为主题，联合北京佑安医院、新疆医科大学附属第一医院、济南市传染病医院、广州市第八医院等六家医院感染、肝病专家

与现有技术相比，本发明具有：操作简单，特异性高，假阳性少，灵敏度高，结果用数字表示，非常明确，对目前已知的所有8种基因型乙肝病毒都可进行明确的区分，且费用较低，适合大范围的推广应用。

希望技术转入方式，实现成果落地