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猪繁殖与呼吸障碍综合征和猪肺炎支原体二联多表位疫苗的制备

成果类型:: 发明专利

发布时间: 2022-10-27 10:22:51

科技成果产业化落地方案
方案提交机构:成果发布人| 涂媛 | 2022-10-27 10:22:52

本发明提供了猪繁殖与呼吸障碍综合征和猪肺炎支原体二联多表位疫苗的制备,包括以下步骤:A、PRRSV的GP5蛋白和GP6蛋白的抗原表位;B、Mhp的P46和P65的抗原表位;C、PRRSV和Mhp抗原表位的重组;D、对重组抗原表位蛋白RP1进行亲水性等分析及二级结构分析;F、重组抗原表位蛋白RP1原核表达载体的构建;G、重组抗原表位蛋白RP1表达及验证;H、重组抗原表位蛋白RP1的纯化及验证。本发明可以同时有效预防PRRSV及Mhp感染,极大的降低了操作难度,节省了疫苗本身和人力注射的成本;能够一次注射,预防多种疾病,适用于养猪业对PRRSV及Mhp的预防,安全性高、免疫效果好。

猪繁殖与呼吸障碍综合征和猪肺炎支原体二联多表位疫苗的制备方法,其特征在于:包括以下步骤:A、PRRSV的GP5蛋白和GP6蛋白的抗原表位:获得PRRSV的GP5和GP6蛋白抗原表位数据,根据表位所在位置和长度进行筛选,筛选出对应使用PRRSV的抗原表位PRRSV‑GP5和PRRSV‑GP6;B、Mhp的P46和P65的抗原表位:使用BepipredLinearEpitopePrediction预测Mhp‑P46和Mhp‑P65蛋白的B细胞表位,使用ProPred‑I预测Mhp‑P46和Mhp‑P65蛋白的T细胞表位,根据表位所在位置和长度进行筛选,筛选出对应使用Mhp的抗原表位Mhp‑P46和Mhp‑P65;C、PRRSV和Mhp抗原表位的重组:将PRRSV‑GP5、PRRSV‑GP6、Mhp‑P46和Mhp‑P65蛋白抗原表位进行重组,得到重组抗原表位蛋白RP1;B细胞表位之间选择柔性态GGGGS间隔连接,T细胞表位与B细胞表位之间以及T细胞表位与T细胞表位之间选择KK连接;重组抗原表位蛋白RP1的DNA序列进行密码子优化后合成相应DNA片段;

猪繁殖与呼吸障碍综合征(Porcinereproductiveandrespiratorysyndrome,PRRS)是一种典型的以母猪生殖障碍及生长猪呼吸窘迫为特征的传染性疾病,其病原体为猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV),具有连续性传染及抗原变化能力,进化速度快、环境适应能力强、传播速度快,涉及范围广泛,严重制约世界养猪业的健康可持续性发展。猪肺炎支原体(Mycoplasmahyopneumonia,Mhp)可引起猪喘气病,此病难以根治,经常季节性爆发,在猪上皮纤维细胞上黏附,破坏呼吸道的滤过功能,造成其他病原菌的继发感染,形成猪的呼吸道疾病综合征(Porcinrespiratorydiseasecomplex,PRDC)。猪群经常感染一种以上的呼吸疾病,因此二联或多联疫苗是目前疫苗研究的热点方向。然而目前设计使用的疫苗大都不是为了联合使用设计的,联合使用可能会降低疗效,目前也没有针对猪肺炎支原体和猪繁殖与呼吸障碍综合征的联合疫苗,所以急需一种能够同时预防猪肺炎支原体和猪繁殖与呼吸障碍综合征交叉感染的联合疫苗。

河北师范大学是一所具有百年历史和光荣传统的省属重点大学。学校起源于1902年创建于北京的顺天府学堂和1906年创建于天津的北洋女师范学堂。1996年6月,原河北师范大学、河北师范学院与创建于1952年的河北教育学院、创建于1984年的河北职业技术师范学院合并,组建成新的河北师范大学。校友中有老一代革命家邓颖超、刘清扬、郭隆真、杨秀峰、康世恩、荣高棠等,有学界名人梁漱溟、张申府、汤用彤等,有中科院院士严陆光、郝柏林等,也有许绍发、蔡振华等一批体育界精英。新中国成立以来,学校共为国家培养了20余万名专业人才。 学校新校区占地1829亩,馆藏图书340.64万册。学校现有在职教职工2856名,其中专任教师1577人,教授405人,副教授994人,中国科学院院士1人,省级以上各类优秀专家106人,博士研究生导师108人,硕士研究生导师578人。在校本、专科生36371人,研究生4191人,成人教育学生14760人。

本发明获得的有益效果为∶本发明制备的猪繁殖与呼吸障碍综合征和猪肺炎支原体二联多表位疫苗,可以同时有效预防PRRSV及Mhp感染,极大的降低了操作难度,既节省了疫苗本身的成本,也节省了人力注射的成本;能够一次注射,预防多种疾病,适用于养猪业对PRRSV及Mhp的预防;同时具备表位疫苗的各项优点,与传统灭活疫苗或弱毒疫苗相比,安全性高、免疫效果好。

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