一种含有IER5基因的表达载体、单克隆细胞系及其应用
成果类型:: 发明专利
发布时间: 2022-10-25 15:12:51
本发明公开了一种含有IER5基因的表达载体和单克隆细胞系,属于医药基因工程领域。IER5基因稳定过表达的细胞系IER5-overexpression-Hela,保藏号为CGMCC No.2812。本发明的表达载体和细胞系为IER5基因在宫颈癌中的作用研究提供实验技术平台。本发明还公开了含有IER5基因的表达载体和单克隆细胞系在肿瘤药物研发和筛选方面的应用。
***5稳定过表达的Hela细胞系,命名为IER5-overexpression-Hela,于2008年12月17日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心,其保藏号为CGMCC No.2812。下面结合具体实施例对本发明作进一步说明。以下实施例仅用于说明本发明而不限制本发明的范围,以下实施例中未注明实验条件或方法的部分,请参阅分子克隆(第二版)或按照试剂盒说明书进行。[0042] 实施例1质粒的构建[0043] 1、PCR扩增IER5目的基因[0044] 模板来源:人的肝组织cDNA文库(购自德国QIAGEN公司)[0045] 引物设计:根据Genebank(登录号:NM_016545)公布的人的IER5序列,设计扩增IER5目的基因的引物,扩增目的片段的序列位于第402-1385bp,长度为984bp,在上游引物中引入EcoR I的酶切位点,下游引物中引入XbalI的酶切位点
IER5为早期反应基因Immediate early response 5的简称,人的该基因位于1号染色体上1q25.3处,编号为NM_016545,全长2369bp;鼠的该基因是位于1号染色体上181.5CM处,编号为NM_010500,长度为2123bp。采用基因芯片检测方法筛选出一些与辐射有关的早期反应基因,这些基因中就有IER5。目前有关IER5的研究主要有:IER5基因序列(Williams M等,Genomics,1999,55:327-334),辐射对IER5基因表达的影响(Tunde E 等,International Journal of radiation oncology biology and physics,2006:
河北医科大学(Hebei Medical University),位于河北省石家庄市,是河北省重点骨干大学,教育部、国家卫生健康委员会、河北省人民政府共建高校,入选卓越医生教育培养计划项目试点高校、临床医学硕士专业学位研究生培养模式改革试点高校。学校初名北洋医学堂,1894年创办于天津,是中国近代第一所官办西医院校。1913年改称直隶公立医学专门学校,1915年由天津迁至保定,1921年与他校合并,称河北大学医科;1932年河北大学解散,医科独立建校,改称河北省立医学院,1937年学校停办,1946年河北省立医学院于保定复校,1947年迁回天津;1949年改称河北医学院,1952年再迁保定,1958年迁至石家庄。1970年天津中医学院并入河北医学院,改称河北新医大学;1979年恢复河北医学院校名;1995年,由河北医学院、河北中医学院、石家庄医学高等专科学校合并组建河北医科大学;2009年原石家庄卫生学校并入,2013年河北中医学院恢复独立建制,学校沿用河北医科大学校名。
本 发 明 的 有 益 效 果:上 述IER5 基 因 过 表 达 的 单 克 隆 细 胞 系IER5-overexpression-Hela对辐射十分敏感,表现出的功能变化比较显著。本发明的IER5基因过表达的单克隆细胞系为深入探索IER5基因在宫颈癌发生发展中的作用提供实验技术平台,也可用于筛选预防或治疗宫颈癌的药物。本发明的目的还在于提供上述表达载体和含有该表达载体的细胞系在筛选预防或治疗宫颈癌药物中的应用,特别是IER5基因稳定过表达的单克隆细胞系在筛选预防或治疗宫颈癌药物中的应用。
技术转让,许可,合作所需资金需双方协商,此项技术想尽快落地保定,希望具备此项技术研发的技术方,能够尽快承接次项目