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草鱼呼肠孤病毒基因工程疫苗制备方法

成果类型:: 发明专利

发布时间: 2022-09-06 14:32:31

科技成果产业化落地方案
方案提交机构:河北省保定市| 涂媛 | 2022-09-07 12:00:36
一种草鱼呼肠孤病毒基因工程疫苗制备方法,其步骤包括:采用sf9昆虫细胞增殖重组GCRV外衣壳蛋白VP5和VP7的重组杆状病毒(vAcGCRV-VP5/VP7);经冻融裂解重组病毒感染的sf9细胞,采用蔗糖衬离心法分离重组蛋白组分,由此得到纯化的体外表达VP5和VP7蛋白复合物;通过将纯化的VP5和VP7蛋白进行鱼体保护实验,证实其具有良好的免疫保护作用。本发明制备的GCRV基因工程疫苗不仅具有良好的稳定性和免疫原性,而且对草鱼鱼苗具有良好的免疫保护作用,其免疫保护率达到90%,适于疫苗规模化大批量生产和应用。
草鱼(Ctenopharyngodon idella)是我国重要的淡水养殖鱼类之一,而草鱼呼肠孤病毒(grass carp reovirus,GCRV)引起的草鱼出血病,是危害草鱼养殖业的主要病毒性疾病。草鱼呼肠孤病毒为双链RNA病毒,含11个基因片段编码11~12个蛋白,同时根据基因型分类为GCRV I型、II型和III型,其中II型是主要的流行病毒,致死率高。但是目前针对II型GCRV的疫苗种类很少,无法满足生产实际的需要,严重制约着草鱼养殖业的健康发展。

我国水产养殖以淡水鱼类为主,其中草鱼(ctenopharyngodonidellus)养殖是淡水养殖中重要的组成部分,也是国内养殖量最大的鱼类。草鱼由于饲料来源广、生长速度快及经济价值高而广受养殖人员的喜爱,养殖范围广且规模大。但草鱼抗病能力差,各个阶段都易受到病害感染,常见疾病有草鱼肠炎病、赤皮病、烂鳃病和病毒性出血病,其中由草鱼呼肠孤病毒(grasscarpreovirus,gcrv)引起的草鱼出血病是草鱼养殖中较为严重的传染病之一,对我国淡水养殖造成巨大的经济损失。

目前市场上草鱼呼肠孤病毒的灭活疫苗和减毒活疫苗正逐步推广使用,而草鱼呼肠孤病毒亚单位疫苗仍没有应用,并且病毒疫苗主要针对的是i型草鱼呼肠孤病毒,当前在国内流行最广、毒力较强的是ii型草鱼呼肠孤病毒。现有的传统疫苗不能满足草鱼养殖业的发展,所以寻找一种安全、稳定、成分明确的草鱼呼肠孤病毒亚单位疫苗具有非常广阔的发展前景和应用价值,对草鱼养殖业的经济发展、养殖环境的改善以及我国提出绿色可持续养殖理念具有重要意义。

中国科学院武汉病毒研究所始建于1956年,是专业从事病毒学基础研究及相关技术创新的综合性研究机构,同时拥有中国唯一一个P4(生物安全最高等级)生物实验室,入选中国科学院知识创新工程,为湖北省暨武汉微生物学会和中国免疫学会青年工作委员会的挂靠单位。 中国科学院武汉病毒研究所针对人口健康、农业可持续发展和国家与公共安全的战略需求,依托高等级生物安全实验室团簇平台,重点开展病毒学、农业与环境微生物学及新兴生物技术等方面的基础和应用基础研究。 武汉病毒所现设有生物学、基础医学2个一级学科研究生培养点,生物化学与分子生物学、微生物学、免疫学、病原生物学、生物与医药5个二级学科研究生培养点,并设有生物学和基础医学2个博士后科研流动站。拥有在学研究生300余人

目前市场上草鱼呼肠孤病毒的灭活疫苗和减毒活疫苗正逐步推广使用,而草鱼呼肠孤病毒亚单位疫苗仍没有应用,并且病毒疫苗主要针对的是i型草鱼呼肠孤病毒,当前在国内流行最广、毒力较强的是ii型草鱼呼肠孤病毒。现有的传统疫苗不能满足草鱼养殖业的发展,所以寻找一种安全、稳定、成分明确的草鱼呼肠孤病毒亚单位疫苗具有非常广阔的发展前景和应用价值,对草鱼养殖业的经济发展、养殖环境的改善以及我国提出绿色可持续养殖理念具有重要意义。

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