科创中国
甜瓜黄瓜遗传转化技术
成果类型：: 发明专利
发布时间: 2022-08-02 16:45:20
科技成果产业化落地方案
方案提交机构：“科创中国”国家乡村特色产业高质量发展产业科技服务团| 王赟 | 2022-09-16 16:00:50
基因编辑是利用 CRIPSR/cas9系统，由具有导向功能的sgRNA 指导具
有核酸切割活性的 Cas9 蛋白对目标基因进行删除、替换、插入等操作，利
用农杆菌介导的遗传转化技术，将CRISPR/cas9系统的模块导入植物体内,
对目标基因位点进行定向的编辑，通过后代将插入模块筛离，获得无转基
因的基因编辑材料。
此方法所涉及高效的葫芦科遗传转化技术和改良的基因编辑体系，均
有本实验室独立研发而来，通过优化遗传转化过程中的重要环节建立了高
效的遗传转化技术，调试了最适再生条件大大提高的再生效率，使用超声
波和纳米刷子在外植体上人工制造微型伤口显著提高了侵染效率，引入了
可视化筛选系统，利用发光的绿色荧光蛋白替代常规的抗生素筛选，不仅
节省了人工，而且大大提高了转化效率和工作效率。通过优化基因编辑的
sgRNA模块和Cas9蛋白模块及添加修饰蛋白，可以实现单靶点，多靶点基
因编辑，精准的碱基替换和定向插入等多种体内基因修饰类型。
1.适用范围广
该技术可以普适于包括黄瓜、甜瓜和南瓜在内的多个葫芦科物种，以
及可以辅助开发难以转化的物种的遗传转化体系。
2.试验周期短
该方法采用了直接再生体系，效率高，周期短2-3个月即可获得TO代
阳性植株，半年即可收获T1代种子。
浙江省农业科学院为浙江省人民政府直属的综合性公益农业科研机构，科学院创办于1911年，主要承担着浙江省农业应用基础研究、高新技术应用及开发研究和科技兴农服务。
截至2013年12月，浙江省农业科学院有职工1964人，其中在职职工1084人，离退休职工880人。在职职工中专业技术人员857人，其中高级371人，中级389人，初级97人；博士（后）284人，硕士253人。
2007年，浙江省农业科学院与浙江师范大学合作成立研究生教育创新基地，开始联合招生 。2001年，浙江省农业科学被浙江省人事厅确定为浙江省博士后科研工作站试点单位，2002年11月经国家人事部批准设立浙江省农业科学院博士后科研工作站，和浙江大学联合招生，2007年12月，经全国博士后管委会办公室批准取得独立招生博士后资格。
本实验室开发的遗传转化技术可以普适子包括黄瓜、甜瓜和南瓜在内
的多了葫芦科物种，以及可以开发难以转化的物种的遗传转化体系，采用
了直接再生体系，效率高，周期短 2-3 个月即可获得 TO 代阳性植株，半年
即可收获T1代种子。
合作方式：技术开发
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各方保留每月审核该项目财务运营的权力，如对财务收支，损益有疑问，有权提出查证原始单据核对帐目。帐目可疑且当事人不能提出合理解释的，项目合作各方有权追究当事人的经济，法律责任。涉及该项目的支出、收入等一切帐目的各项原始收支单据须经各方签字认可，交财务管理员做帐。
技术，市场保密
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该项目所得利润按合作方所占的不同股权比例按股分成，其中甲方占股权分成%，乙方占股权分成%。在保证项目正常运作的情况下，每年进行年终分红一次(每年元月对上一年度红利进行分成)。扩大业务运营如需要提留利润时，必须经过各方认可，且不得超过年度利润总额的30%。该提留按各方所占股权比例计为各方的的股本金投入。
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