本发明公开了一种含多不饱和脂肪酸的中长碳链甘油三酯的制备方法及其产品,包括,酶法醇解多不饱和脂肪酸油脂获得富含sn 2单甘脂的酶解产物,通过溶剂结晶分提去除富含sn 2单甘脂的酶解产物中含饱和脂肪酸的sn 2单甘脂,获得富含多不饱和脂肪酸的sn 2单甘脂;将富含多不饱和脂肪酸的sn 2单甘脂溶剂萃取除去中性脂质获得高纯度sn 2单甘脂;向高纯度sn 2单甘脂中加入中碳链脂肪酸,通过酶法酯化获得高纯度MLM型中长碳链甘油三酯。本发明高纯度MLM型中长碳链甘油三酯中sn 2位多不饱和脂肪酸含量在70%以上,sn 2位饱和脂肪酸小于12%,且MLM型在85%以上,有利于功能性脂肪酸的消化吸收。

本部分的目的在于概述本发明的实施例的一些方面以及简要介绍一些较佳实施例。在本部分以及本申请的说明书摘要和发明名称中可能会做些简化或省略以避免使本部分、说明书摘要和发明名称的目的模糊，而这种简化或省略不能用于限制本发明的范围。

鉴于上述的技术缺陷，提出了本发明。

因此，作为本发明其中一个方面，本发明克服现有技术中存在的不足，提供一种含多不饱和脂肪酸的中长碳链甘油三酯的制备方法。

为解决上述技术问题，本发明提供了如下技术方案：一种含多不饱和脂肪酸的中长碳链甘油三酯的制备方法，包括，将含多不饱和脂肪酸油脂与乙醇按照摩尔比1:5～15的比例混合，加入可密封的间歇式反应器中，并向其中加入4～12wt％的脂肪酶，在温度为20～30℃、搅拌速率为400～800rpm的条件下密封反应6～14h，得富含sn-2单甘脂的酶解产物，其中，sn-2单甘脂含量在85％以上；通过溶剂结晶分提去除富含sn-2单甘脂的酶解产物中含饱和脂肪酸的sn-2单甘脂，获得富含多不饱和脂肪酸的sn-2单甘脂；将富含多不饱和脂肪酸的sn-2单甘脂溶剂萃取除去中性脂质获得高纯度sn-2单甘脂；向高纯度sn-2单甘脂中加入中碳链脂肪酸，通过酶法酯化获得高纯度MLM型中长碳链甘油三酯；其中，所述高纯度MLM型中长碳链甘油三酯中sn-2位多不饱和脂肪酸含量在70％以上，且MLM型在85％以上。

中长链甘油三酯(MLCTs)是一种被广泛研究并应用于临床的结构脂质产品，是通过生物或者化学催化法获得中碳链脂肪酸(MCFAs)和长碳链脂肪酸(LCFAs)结合于同一甘油骨架的新型结构甘油脂混合物，最典型的是中-长-中碳链型结构脂(MLM)。中碳链脂肪酸具有较强的水溶性，因而在胃消化过程可被快速水解，并通过门静脉吸收至肝脏提供即时能量。消化产生的甘油二酯(DAG)或甘油一酯(MAG)可作为乳化剂在小肠中起到乳化作用，提高脂质的比表面积，协助胰脂酶进行脂质消化，在一定程度上弥补消化系统不完善所带来的缺陷。因此，在MLCTs中结合功能性脂肪酸，如多不饱和脂肪酸(DHA，ARA，EPA等)将有利于其消化吸收。

脂肪酸在甘油骨架的位置影响其在人体内的代谢，脂肪酸在sn-2位比在sn-1,3位具有更高的生物利用率。因此，可以判断，MLM中长链甘油三酯，一方面有利于MCFAs提供快速能量，另一方面有利于提升LCFAs的生物利用率，是MLCTs中最理想的分子形式。

在MLCTs合成方面，报道多采用中碳链甘油三酯(MCT)与长碳链甘油三酯(LCT)进行酶法酯交换反应得到产品。由于酶催化的反应为可逆反应，MCT与LCT既是反应中的反应物，也是反应后的产物。因此，在反应产物中均含有一定量的MCT与LCT，从而导致MLCTs的含量不高。由于在酯交换反应中引入了MCT，也导致最终产物中功能性脂肪酸的含量降低。同时，反应中并不能确定MCFAs在TAG上的位置，故理想的MLM型MLCTs得率降低。也有采用特异性酶催化定向酸解的方法制备得到MLCTs，在催化过程中，由于大多数功能性脂肪酸为长链多不饱和脂肪酸，脂肪酶酶对其的活性较低，同时由于可逆反应中，存在反应平衡，因此会形成大量的含有LLM型MLCTs，理想型MLM含量较低。同时，由于所选择的食用油在sn-2位可能含有其它饱和脂肪酸，最终降低MLCTs中sn-2位功能性脂肪酸的含量。

因此，如何制备高纯度的MLM型MLCTs，且制备工艺简单是本领域有待解决的技术问题。

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(1)本发明提供一种含多不饱和脂肪酸的中长碳链甘油三酯的制备方法，首次结合酶法醇解、溶剂结晶分提、溶剂萃取以及酶法酯化的方法制备得到高纯度的MLM型MLCTs，通过酶法醇解获得富含sn-2MAG的酶解产物，溶剂结晶分提去除含饱和脂肪酸的sn-2MAG，溶剂萃取除去中性脂质获得高纯度sn-2MAG，最后通过以MCFAs为酰基供体的酶法酯化获得高纯度的MLM型MLCTs，所得含多不饱和脂肪酸的中长碳链甘油三酯产品中，sn-2位多不饱和脂肪酸含量在70％以上，sn-2位饱和脂肪酸含量小于12％，且MLM型含量在85％以上。

(2)本发明通过溶剂结晶分提去除sn-2位的饱和脂肪酸，获得的产品sn-2位多不饱和脂肪酸含量高，同时，制备工艺简单，所得的MLCTs种类主要为MLM，有利于功能性脂肪酸的消化吸收。

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