一种转录调控蛋白及其在共轭亚油酸生产中的应用
成果类型:: 实用新型专利
发布时间: 2022-06-25 07:55:31
本发明公开了一种转录调控蛋白及其在共轭亚油酸生产中的应用,属于蛋白质工程和微生物工程技术领域。本发明的氨基酸序列如SEQ ID No.1所示的转录调控蛋白可提高共轭亚油酸生产菌株生产共轭亚油酸的产量,将含有本发明转录调控蛋白的重组短双岐杆菌接种至含有亚油酸的培养基中培养72h,即可使培养液中共轭亚油酸的产量高达0.48mg/mL、转化率高达96%,其中,cis9,trans11 CLA占培养液中共轭亚油酸总量的96%、trans9,trans11 C占培养液中共轭亚油酸总量的4%。
[技术问题]
本发明要解决的技术问题是提供一种可提高共轭亚油酸生产菌株生产共轭亚油酸的产量的转录调控蛋白。
[技术方案]
为解决上述问题,本发明提供了一种转录调控蛋白,所述转录调控蛋白为:
(a)由SEQ ID No.1所示的氨基酸序列组成的蛋白质;或者,
(b)在(a)中的氨基酸序列经过取代、缺失或添加一个或几个氨基酸且具有转录调控蛋白活性的由(a)衍生的蛋白质。
本发明还提供了一种基因,所述基因编码上述转录调控蛋白。
在本发明的一种实施方式中,所述基因的核苷酸序列如SEQ ID No.2所示。
本发明还提供了一种重组质粒,所述重组质粒携带上述基因。
在本发明的一种实施方式中,所述重组质粒以pNZ44质粒为表达载体。
共轭亚油酸(Conjugated linoleic acid,CLA)是一系列含有共轭双键、具有多种位置和几何异构体的脂肪酸的总称。研究表明,共轭亚油酸具有缓解心血管疾病、减肥、抗炎症、缓解糖尿病症状等作用,因此,共轭亚油酸被广泛应用于医药、食品、化妆品等领域。
不同共轭亚油酸异构体之间在功能上存在显著的区别,其中,cis9,trans11-CLA和trans10,cis12-CLA是公认的最具有生理活性的两种共轭亚油酸异构体,因此,市场上对cis9,trans11-CLA和trans10,cis12-CLA的需求极大。
天然的共轭亚油酸主要存在于瘤胃动物、某些植物和海洋生物中,并且,这些天然的共轭亚油酸主要以cis9,trans11-CLA的形式存在,生理活性极高,但是,它们含量极少,难以满足市场对于共轭亚油酸的需求。因此,人们逐渐开发了人工合成共轭亚油酸的方法。
目前,人工合成共轭亚油酸的方法主要有化学合成法以及微生物合成法。其中,化学合成法会导致很多有毒性的副产物的产生,对环境以及人体均具有毒害作用,并且,通过化学合成法制备得到的共轭亚油酸异构体种类多,很难进行有效的分离,因此,化学合成法无法真正实现共轭亚油酸的大规模工业化生产。与化学合成法相比,微生物合成法具有污染少、所得共轭亚油酸异构体种类单一的优点,因此,微生物合成法是一种极具潜力的可实现共轭亚油酸大规模工业化生产的方法。
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本发明的氨基酸序列如SEQ ID No.1所示的转录调控蛋白可提高共轭亚油酸生产菌株生产共轭亚油酸的产量,将含有本发明转录调控蛋白的重组短双岐杆菌接种至含有亚油酸的培养基中培养72h,即可使培养液中共轭亚油酸的产量高达0.48mg/mL、转化率高达96%,其中,cis9,trans11-CLA占培养液中共轭亚油酸总量的96%、trans9,trans11-CLA占培养液中共轭亚油酸总量的4%。
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