本发明公开了一种蛋白水解酶及其在蛋白肽生产中的应用,属于微生物技术领域以及发酵技术领域。本发明提供了一种来源于暗灰链霉菌(Streptomyces canus)T20的氨基酸序列如SEQ ID No.2所示的蛋白水解酶,此蛋白水解酶酶解蛋白的能力强,将此蛋白水解酶以2400U/g蛋白的添加量加入大米蛋白浓度为10g/L的大米蛋白分散液中进行酶解,仅需酶解2h,即可使酶解上清液中小分子肽的含量高达74.81%。

本发明提供了一种生产大米肽的方法，此方法仅需将来源于暗灰链霉菌(Streptomyces canus)T20的氨基酸序列如SEQ ID No.2所示的蛋白水解酶加入含有大米蛋白的大米蛋白分散液中进行酶解，即可获得富含小分子肽的大米肽，制备工艺简单、制备周期短且成本低。

大米是我国第一大粮食品种。大米蛋白则是国际公认的优质蛋白。与大豆蛋白、乳清蛋白等蛋白相比，大米蛋白的营养抑制因子含量少，无过敏反应，大米蛋白包含人体所需氨基酸且氨基酸配比合理，另外，大米蛋白的生物价远超大豆蛋白，可与虾及牛肉等的生物价相媲美，符合世界卫生组织(WHO)推荐的理想模式。

但是，大米蛋白由于含有较多谷蛋白，不易溶解，因此，目前，大米蛋白多用作动物饲料添加剂。为了提高大米蛋白的附加值，将其水解成短肽或氨基酸后，还可以制成营养价值更高的短肽或氨基酸营养液，作为高价值添加剂运用于保健品、饮料、化妆品等行业。高纯度的大米肽价格在10万/吨以上。

目前，小分子肽的制备方法主要有酶解法、微生物发酵法、酸碱解法、化学合成法等，其中，酶解法是工业上可行，安全性高，而且绿色环保的一种方法。但是，现有的酶解法仍具有许多缺陷，例如，公开号为CN1102229643A的专利中所记载的制备方法可使所得大米肽产品中的小分子肽含量高达50％左右，但其在制备过程中需采用多种酶制剂协同酶解，并且，其需要使用中空纤维膜，这大大延长了大米肽产品的生产周期，增加了大米肽产品的工业生产成本；公开号为CN103440949A的专利则先采用粉碎、调浆、洗涤、调浆、反应、浓缩、脱水等步骤对大米米渣进行预处理，然后再采用多种蛋白水解酶协同处理经预处理的大米米渣，但是，此方法主要以预处理方式提高大米肽产品中的小分子肽含量，其酶解过程前后，大米肽产品中的小分子肽含量变化不显著，并且，此方法制备步骤繁琐、能耗大、加酶量大，不利于工业化进程。

因此，急需找到一种制备工艺简单、制备周期短、成本低且制备得到的大米肽中小分子肽含量高的制备大米肽的方法以克服上述缺陷。

该成果发明人：吴敬 颜正飞 秦琴

江南大学是教育部直属、国家“211工程”重点建设高校和“双一流”建设高校。学校具有悠久的办学历史、厚重的文化积淀，源起1902年创建的三江师范学堂，历经国立中央大学、南京大学等发展时期；1958年南京工学院食品工业系整建制东迁无锡独立建校，成立无锡轻工业学院；1962年无锡纺织工学院并入无锡轻工业学院；1995年更名为无锡轻工大学；2001年无锡轻工大学、江南学院、无锡教育学院合并组建江南大学；2003年东华大学无锡校区并入江南大学。

(1)本发明提供了一种来源于暗灰链霉菌(Streptomyces canus)T20的氨基酸序列如SEQ ID No.2所示的蛋白水解酶，此蛋白水解酶酶解蛋白的能力强，将此蛋白水解酶以2400U/g蛋白的添加量加入大米蛋白浓度为10g/L的大米蛋白分散液中进行酶解，仅需酶解2h，即可使酶解上清液中小分子肽的含量高达74.81％。

(2)本发明提供了一种生产大米肽的方法，此方法通过使用来源于暗灰链霉菌(Streptomyces canus)T20的氨基酸序列如SEQ ID No.2所示的蛋白水解酶，大大提高了大米肽中小分子肽的含量，将暗灰链霉菌(Streptomyces canus)T20发酵获得的发酵上清液以2400U/g蛋白的添加量加入大米蛋白浓度为10g/L的大米蛋白分散液中进行酶解，仅需酶解2h，即可使酶解上清液中小分子肽的含量高达74.81％。

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