科创中国
一种胃癌新型分子标记物hsa_circ_0001017的检测及应用
成果类型：: 发明专利
发布时间: 2022-06-20 11:29:26
科技成果产业化落地方案
方案提交机构：浙江省温州市| 姚情秘 | 2022-11-23 15:29:20
本发明涉及一种用于胃癌诊断的环状RNA分子标记物，其特征在于：该环状RNA为hsa_circ_0001017，本发明还提供一种检测血浆中状RNA分子标记物的方法，包括如下步骤：(1)采集血液，提取血浆中的总RNA；(2)将总RNA逆转录成cDNA；(3)利用特异性扩增背对背引物和看家基因GAPDH的扩增上下游引物对步骤(2)的cDNA溶液进行数字微滴PCR检测，反应结束后检测所有微滴的荧光信号值并设定阈值，根据阈值确定微滴是否包含环状RNA或看家基因GAPDH，高于阈值的微滴为阳性微滴，低于阈值的微滴为阴性微滴；(4)统计阳性微滴数，计算得到血浆中hsa_circ_0001017和看家基因GAPDH的拷贝数，以对血浆中的hsa_circ_0001017进行定量检测，与现有技术相比，本发明的优点在于在胃癌患者血浆中的特异性表达上调hsa_circ_0001017可作为胃癌诊断的新型分子标记物。
本发明提供的方法取样方便快捷，仅需采集微量1ml血液即可检测出hsa_circ_0001017的存在，灵敏度高，可检测出每微升血液中所含hsa_circ_0001017的确切拷贝数。
全球癌症统计中，胃癌发病率列居前位，中国又是胃癌高发大国。尽管诊断技术在不断提高，以手术治疗为主的综合治疗手段越来越丰富，但胃癌依旧是全球主要癌症致死性疾病之一。而且，现有的肿瘤标志物CEA、CA19‑9、CA50、CA125在胃癌诊断中的敏感度与特异性并不高，虽然CA72‑4对胃癌具有较高特异性，但通常也只有在胃癌的III‑IV期才出现增高。因此，寻找可靠的生物标志物作为早期诊断依据和可靠的治疗靶点成为当务之急。
郭俊明教授主要从事肿瘤分子生物学、基因诊断与基因治疗等方面的研究。近年来，主持完成和在研国家和省部级科研课题5项，如国家自然科学基金项目“中国畲族人群DNA多态性研究“、“胃癌相关piRNA的鉴定及其诊断价值分析” ；浙江省自然科学基金项目“胃癌组织中Hiwi相互作用RNA的鉴定及其功能分析”；浙江省科技攻关项目“新型胃癌标志物的筛选与胃癌诊断试剂的研制” 等，与李田文、肖丙秀等人共同研发。
在胃癌患者血浆中的特异性表达上调的hsa_circ_0001017可作为胃癌诊断的新型分子标记物，利用该分子标记物可以简单、快捷地进行胃癌诊断，而检测血浆中该分子标记物的方法是基于荧光染料法数字微滴PCR来检测，相对于以往的荧光定量PCR，微滴式数字PCR在检测低拷贝基因时更加灵敏和准确，并且不需要使用探针进行定量检测，费用成本大大降低。
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