本发明一种大黄鱼增殖放流的分子标志物及其筛选方法，特点是包括3,4‑二羟基杏仁酸、对羟基苯基乙酰硫代氢氧酸酯、丙基戊二酸、皮质醇、麦角硫茵氨基酸、(R)‑甲羟戊酸、循环去氧黄嘌呤氟他洛辛、甲羟戊酸、生物素、8‑氨基‑7‑氧代壬酸酯、N‑花生四烯多巴胺、肾上腺素、δ1‑哌啶‑2‑羧酸酯、肌酸和卡利车霉素和T0 L‑2‑氨基己二酸酯6‑半醛等，筛选方法步骤如下：取暂养不同时间的大黄鱼肌肉样本，采用LC‑MS/MS定性及定量的确定大黄鱼肌肉组织的小分子代谢物，通过火山图和主成分分析确定大黄鱼鱼苗适应放流水域的时间，通过偏最小二乘判别分析和维恩图筛选出，优点是降低大黄鱼暂养成本及提高增殖放流成活率。

与现有技术相比，本发明的优点在于：本发明首次公开了一种大黄鱼增殖放流的分子标志物及其基于液相‑串联质谱技术的筛选方法，利用基于LC‑MS/MS技术的代谢组学方法分析放流水域暂养对大黄鱼体内代谢产物的影响，对暂养不同时间的大黄鱼肌肉组织进行检测，得到相应代谢物定性及定量数据，并对数据进行Volcano plot、PCA、OPLS‑DA、维恩图建模，确定放流前大黄鱼鱼苗合适暂养时间，并且根据差异代谢物，得到指示大黄鱼已经适应放流水域的分子标志物，通过该方法所得分子标志物对于指示水生生物是否适应新环境具有良好的灵敏性和特异性，尤其适合于水生生物放流前的暂养工作，对于降低大黄鱼暂养成本及提高增殖放流成活率具有重要意义。

术[0002] 大黄鱼（Larimichthys crocea）俗称黄花鱼，其主要生活在我国黄海中南部至琼州海峡的近岸海域，是我国四大海洋渔业品种之一。但由于过度捕捞和栖息环境恶化而导致我国大黄鱼野生资源量急剧衰退甚至于枯竭。针对目前大黄鱼资源衰退的现象，实施增殖放流是最直接、最根本的资源恢复措施。自1998年开始，大黄鱼增殖放流工作对浙东沿海等海域大黄鱼资源的恢复性增长起到了积极的促进作用，深受沿海渔民的欢迎，取得了良好的生态、社会和经济效益。但是，放流工作技术上仍旧存在很多不足，其中选择放流对象、苗种规格、数量和合理配比投放等方面存在一定盲目性，特别是增殖放流前鱼苗暂养工作缺乏科学的评估标准。代谢组学（Metabolomics）技术是观察生物体细胞经过刺激或者影响后，生物体细胞中的代谢产物随和时间波动变化的学科，广泛应用于生物标志物的发现、临床诊断、药效与药毒评估、环境暴露等研究。其主要原理为利用液相色谱质谱联用(LC‑MS)、气相色谱质谱联用(GC‑MS)、核磁共振(NMR)技术进行检测，获得代谢物的定性定量信息。通过比较不同组别样品中代谢物的含量变化，寻找差异代谢物，并探索差异代谢物相关的代谢通路。不同于基因组学和蛋白组学反映的生物体内在差异，代谢组学的研究领域扩展到了机体与环境之间的相互影响和作用。小分子代谢物不仅是机体生命活动、生化代谢的物质基础，还体现了某些外来因素对体内代谢环境的改变，因而某些独特代谢物的浓度在不同个体间的差异事实上反映了生物体对外界环境的反应。代谢组学所得到的信息与生物的表现型最为接近，对代谢终产物的研究，可以揭示生物系统受环境影响后的变化规律和相关机制。有研究发现，对暴露于双酚A下的斑马鱼体内脂肪酸和氨基酸产物进行代谢成分分析，结果表明苯丙氨酸和赖氨酸的表达量显著上升，脂肪酸中的十四烷酸表达量也明显上升。另外有研究通过代谢组学技术分析发现，菲律宾蛤仔在铜污染的环境中，体内柠檬酸代谢途径的中间产物琥珀酸以及丙氨酸表达量显著下降。此外，水环境中汞污染导致菲律宾白色蛤仔肌肉代谢产物发生明显变化，被用作为环境中汞含量的指标生物。目前，代谢组学技术在水生生物中得到了广泛的应用，特别是在评估水生生物的环境适应性研究中发挥重要的作用。

李成华，1978年9月生，博士，研究员，博士生导师，瑞典乌普萨拉大学（Uppsala University）博士后，中国海洋与湖沼学会棘皮动物分会理事,浙江省动物学会理事，兼副秘书长。先后获得中国水产学会首届青年科技奖（2016年）；国家优秀青年科学基金（2015年），宁波市领军和拔尖人才工程第一层次（2015年），浙江省杰出青年科学基金（2014年），浙江省高等学校中青年学科带头人（2013年），浙江省151第三层次培养人员（2011年）等人才工程资助。先后主持国家自然科学基金4项、浙江省杰出青年科学基金和浙江省科技厅国际合作项目等科研项目。目前主要从事海洋生物分子免疫学、病害防治和分子设计育种等方面的研究工作，在刺参免疫相关miRNA发掘和功能研究 以及病原微生物治病机制领域取得重要进展。以第一作者或通讯作者在"Genetics "、“Sci Rep”、" J Hazard Mater "、“***”“Dev Comp Immunol”等期刊发表SCI论文60余篇，个人H指数21。指导研究生获得国家奖学金6人次（3年）。

为了研发该成果，团队成员投入了大量人力和物力，并且取得了一定收益，对于技术上存在的缺陷，团队成员会加以完善和修正，此发明对于显著提高人民生活水平，提高我国经济发展实力与科技力量，推动科技进步提高都有极大且及其重要的意义。

技术合作，遣派学者专家到国外或者其他地区的高校，研究机构或者生产企业与对方的学者，专家合作进行研究设计，或者双方学者，专家轮流到对方学校，研究机构或者企业进行研究。