您所在的位置: 成果库 一种高活性和高浓度底物耐受性的天冬酰胺合成酶A突变体及其应用

一种高活性和高浓度底物耐受性的天冬酰胺合成酶A突变体及其应用

发布时间: 2025-11-05

基本信息

合作方式： 技术转让
成果类型： 发明专利
行业领域：
生物与新医药技术,医药生物技术
成果介绍
本发明公开了一种高活性和高浓度底物耐受性的天冬酰胺合成酶A突变体及其应用，所述天冬酰胺合成酶A突变体是将来源于唾液乳杆菌Lactobacillus salivarius的天冬酰胺合成酶A氨基酸序列的第53位的赖氨酸突变为丙氨酸、第71位的组氨酸突变为缬氨酸、第100位的精氨酸突变为丙氨酸、第110位的组氨酸突变为谷氨酸、第214位精氨酸突变为谷氨酸、第218位的酪氨酸突变为甘氨酸获得。本发明通过蛋白质工程技术进行分子改造，获得了高酶活以及较高底物耐受性的天冬酰胺合成酶突变体催化剂，该突变体能够生物催化生成L‑天冬酰胺。
成果亮点
多重理性设计精准优化 通过K53A/H71V/R100A/H110E/R214E/Y218G六点联合突变，重构底物结合通道与电荷分布，突变体比酶活提升至野生型的4.8倍，对L-天冬氨酸的Km值降低62%。 底物耐受性显著增强 突变体在300mM L-天冬氨酸浓度下仍保持92%相对酶活（野生型在150mM即下降至65%），突破高底物浓度抑制瓶颈。 催化效率与稳定性同步提高 催化常数kcat提升3.3倍，60℃半衰期延长至野生型的5.2倍，固定化后重复使用12批次活性保留85%。 工艺经济性大幅改善 突变体催化L-天冬酰胺合成转化率达96%，铵盐利用率提升至88%，单位产量酶耗量降低57%。
团队介绍
江南大学 罗玮; 贾长龙
成果资料