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一种产2,5-二甲基吡嗪重组大肠杆菌及其应用
发布时间: 2025-11-05
基本信息
合作方式：
技术转让
成果类型：
发明专利
行业领域：
生物与新医药技术,医药生物技术
成果介绍
本发明公开了一种产2,5‑二甲基吡嗪重组大肠杆菌及其应用，属于基因工程技术领域。本发明运用CRISPR/Cas9基因编辑系统，以大肠杆菌TWF001为出发菌株，通过敲除或过表达以葡萄糖为底物的2,5‑二甲基吡嗪代谢通路中相关基因，得到了能够在工业发酵中稳定表达的产2,5‑二甲基吡嗪重组大肠杆菌。本发明提供的重组大肠杆菌遗传稳定，发酵条件温和，成本低廉，能够应用于食品和医药行业，在工业生产中具有广阔的应用前景。
成果亮点
精准代谢通路重构
运用CRISPR/Cas9技术敲除竞争途径基因（如ldhA, poxB），同时过表达关键合成基因（ribBA, gcvTHP），将碳流导向2,5-二甲基吡嗪合成，产量达3.8g/L，较出发菌株提高25倍。
工业级发酵稳定性
重组菌在50L发酵罐中连续传代15次仍保持98%以上质粒保留率，目标产物批次间波动＜5%，具备规模化生产潜力。
低成本培养基优化
采用葡萄糖-硫酸铵基础培养基，添加微量维生素B1（0.1mM）促进前体积累，原料成本较传统配方降低40%。
绿色安全生产特性
发酵液中毒性副产物乙酰甲基甲醇含量＜10mg/L，产物可直接用于食品香料领域，无需复杂纯化处理。
团队介绍
江南大学
罗玮; 曾明曦
成果资料
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