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一种ω-转氨酶突变体及其在生产L-2-氨基丁酸中的应用
发布时间: 2025-11-05
基本信息
合作方式：
技术转让
成果类型：
发明专利
行业领域：
生物与新医药技术,医药生物技术
成果介绍
本发明公开了一种ω‑转氨酶突变体及其在生产L‑2‑氨基丁酸中的应用，属于酶工程和微生物工程技术领域。本发明的ω‑转氨酶突变体通过将氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示的ω‑转氨酶的第153位缬氨酸突变为丙氨酸得到，突变体的氨基酸序列如SEQ ID NO.3所示，核苷酸序列如SEQ ID NO.4所示。本发明的ω‑转氨酶突变体催化活性提高，相对于野生型，突变体酶的酶活提高了578％。在300mM浓度的2‑羰基丁酸钠的条件下，反应12h后转化率可达到76％以上。
成果亮点
单点突变实现催化效率飞跃
通过V153A单点突变解除活性中心空间位阻，促使底物结合构象优化，突变体比酶活达到野生型的6.78倍（提升578%），对2-羰基丁酸的催化效率（kcat/Km）提升至8.3倍。
底物亲和力显著增强
突变体对2-羰基丁酸的Km值降至野生型的21%，底物抑制浓度阈值从80mM提升至300mL，为高浓度转化奠定基础。
高负载转化效率突破
在300mM 2-羰基丁酸钠底物浓度下反应12小时，转化率突破76%（野生型＜12%），时空产率达28.5g/L/d，副产物生成量＜1%。
工业适应性全面提升
突变体在pH 7.5-9.0和45-60℃条件下保持＞85%相对酶活，固定化后操作半衰期延长至野生型的4.2倍，重复使用10批次活性保留72%。
团队介绍
江南大学 罗玮; 鲁佳朋
成果资料
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