成果介绍
本发明涉及一种蓝光诱导酿酒酵母定点DSB系统,构建步骤如下:构建site‑I‑SceI‑KanM转化盒,利用pC120‑El222蓝光诱导型启动子,利用PEG/LiAC法向酵母中进行转化,即得蓝光诱导酿酒酵母定点DSB系统。本发明以酿酒酵母为载体,利用蓝光介导调节归位内切酶I‑SceI表达,并建立的定点DSB诱导系统,并验证了系统的可行性。本发明的提供的蓝光诱导酿酒酵母定点DSB系统,在蓝光诱导下,无毒无害、相应迅速,操作简单,可逆性好。
成果亮点
新型光遗传控制工具
利用pC120-El222蓝光诱导系统,在酿酒酵母中实现I-SceI内切酶的时空调控,诱导表达响应时间小于10分钟,且过程无需化学诱导剂,无毒无害,生物安全性高。
高效可逆的DSB诱导
蓝光照射可快速触发定点双链断裂,黑暗条件下系统自动关闭,实现基因操作的动态可逆调控,同源重组效率较传统化诱提高8倍以上。
操作简便且兼容性强
采用PEG/LiAC法转化,无需复杂设备,且site‑I‑SceI‑KanMX转化盒可适配多种酵母遗传背景,为真核生物DNA修复机制研究提供便捷平台。
为DNA损伤修复研究提供优质模型
系统可模拟生理性DNA损伤与修复过程,已成功用于筛选影响基因组稳定性的因子,在药物基因毒性评估及肿瘤学研究中有广泛应用前景。
团队介绍
天津科技大学
周飒; 李佳瑶; 马文建; 宋国栋; 牛家蕾; 吴恒宇; 吉南希
成果资料