成果介绍
本研究构建了高表达miR-221-3p的工程化间充质干细胞外泌体(EVmiR-221-3p),在体外水平证实EVmiR-221-3p能够修复高糖损伤成纤维细胞功能。在体内水平,通过优化给药方式——采用HAMA水凝胶负载外泌体,从而发挥更好的促进糖尿病创面愈合的效果。
成果亮点
创新技术:首先,提取并鉴定人胎盘间充质干细胞(dMSCs)。接着,采用电穿孔方式构建高表达miR-221-3p的间充质干细胞外泌体(EVmiR-221-3p),并通过内吞实验,证实所构建的工程化外泌体能够被成纤维细胞吞噬。在体外水平,通过EdU实验证实,EVmiR-221-3p能够促进成纤维细胞的增殖功能;通过细胞划痕试验,证实EVmiR-221-3p能够促进成纤维细胞的迁移能力;通过Western-blotting我们证实,在高糖环境下,成纤维细胞中的TGF-β1、p-Smad2/3、Smad7、α-SMA蛋白表达均下调。当与EVmiR-221-3p共培养时,高糖损伤成纤维细胞中TGF-β1、p-Smad2/3、Smad7、α-SMA的表达上调,而TGF-β抑制剂sb431542可阻断该作用。该结果表明EVmiR221-3p通过上调TGF-β/Smad通路修复高糖损伤成纤维细胞的功能。最后,在体内水平,采用甲基丙烯酰化透明质酸(HAMA)负载EVmiR221-3p并注射于糖尿病小鼠创面模型,结果显示,在术后14天,EVmiR+HAMA组能够显著促进糖尿病小鼠创面愈合。
团队介绍
南京医科大学(Nanjing Medical University),位于江苏省南京市,是教育部、中华人民共和国国家卫生健康委员会、江苏省人民政府共建高校和江苏高水平大学建设高校,是国家“双一流”建设高校、第一批卓越医生教育培养计划项目试点高校、高水平公共卫生学院建设高校、国家建设高水平大学公派研究生项目实施高校、国家“特色重点学科项目”建设高校、中国政府奖学金来华留学生接收院校、江苏省高层次人才培养计划“333工程”培训基地、长三角医学教育联盟创始成员。
成果资料