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多重ddPCR技术用于肿瘤多位点突变的检测
发布时间: 2024-08-09
基本信息
合作方式：
技术转让
成果类型：
发明专利
行业领域：
生物与新医药技术,医药生物技术
成果介绍
对KRAS、NRAS、BRAF和PIK3CA基因突变的检测对指导肿瘤患者精准靶向用药和预后判断至关重要。本项目通过两重ddPCR成功实现在两管内对KRAS、NRAS、BRAF和PIK3CA基因的14种热点突变进行定性检测。方法检测灵敏度高，能够检测出低至***%丰度的突变靶标。在30例临床样本的检测中，各个靶标的检测结果与直接测序法的一致性均达到100%。并进一步通过增加荧光通道数量，构建四通道ddPCR实现不同点突变的分型与定量。定量结果与预期具有良好的一致性，R2均达到***以上，定量检测限均低至1 copies/μl。在对7例KRAS突变型的临床样本检测中，成功实现突变型的再分类与定量检测，并且通过拷贝数的计算确定样本突变率。
成果亮点
（1）方法检测灵敏度高，能够检测丰度为***%的突变。（2）单管反应能够检测的靶标重数多，能够实现4种/3种不同靶标的同时检测，样本消耗低。（3）检测时间短，整个检测流程所需时间小于5小时，而直接测序法所需时间大于24小时。（4）与现有的利用ARMS-PCR法的商用试剂盒相比，本研究能检测到野生型探针覆盖到的未知突变，并能实现突变位点的分型与定量分析，这是ARMS-PCR所无法实现的。因此，多重ddPCR是一种在肿瘤多位点突变检测中具有很大应用潜力的方法。
团队介绍
深圳大学（Shenzhen University），简称“深大”，位于广东省深圳市，由广东省人民政府管理，业务主管部门是广东省教育厅。学校为广东省高水平大学重点建设高校 、国家级人才培养模式创新实验区、全国地方高校UOOC联盟发起单位、粤港澳高校联盟成员单位，具有推荐免试研究生资格高校，是国家大学生文化素质教育基地、全国文明校园、全国民族团结进步示范学校、全国首批深化创新创业教育改革示范高校 [和国家知识产权试点示范高校 。
截至2024年6月，深圳大学有粤海、丽湖两个校区，校园总占地面积***平方公里，总建筑面积***万平方米。设有27个学院，104个本科专业和3个中外合作办学专业，3所直属附属医院。有国家级特色专业5个，国家级一流本科专业建设点34个，省级一流学科17个；有学术学位博士授权一级学科15个，专业学位博士授权类别2个 ；博士后科研流动站14个，博士后工作站1个。有硕士学位授权一级学科36个，专业硕士学位授权类别27个。有教职工4198人，在校生44554人。
成果资料
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