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细胞外囊泡介导高效繁殖非洲猪瘟病毒的方法
发布时间: 2024-07-18
基本信息
合作方式：
技术转让
成果类型：
发明专利
行业领域：
生物与新医药技术
成果介绍
本发明提供了一种高效繁殖非洲猪瘟病毒的方法。传统非洲猪瘟病毒繁殖依赖于原代巨噬细胞,成本高,批次间变异大,无法大规模工业化生产,严重阻碍了非洲猪瘟疫苗的研发和生产。本发明首先提取非洲猪瘟病毒感染的猪肺泡巨噬细胞的细胞外囊泡,再将提取的细胞外囊泡与非洲猪瘟病毒共同孵育永生化野猪肺细胞,72小时感染阳性率可达到100%,病毒滴度可以达到107 TCID50/mL以上。该方法可以满足非洲猪瘟病毒疫苗工业化生产的低成本、稳定性和安全性的要求,避免原代巨噬细胞的缺点,摆脱对原代巨噬细胞的依赖,为工业化生产非洲猪瘟疫苗提供了一种新型繁殖病毒方式。
成果亮点
为了解决非洲猪瘟疫苗生产中病毒繁殖的技术难题，本发明创新了非洲猪瘟病毒的繁殖方法，提供了一种利用细胞外囊泡进行非洲猪瘟病毒高效繁殖的方法。通过提取非洲猪瘟病毒易感细胞的细胞外囊泡，与非洲猪瘟病毒共同孵育永生化野猪肺细胞，可以实现与原代巨噬细胞相当的病毒繁殖效率，且完全满足非洲猪瘟病毒疫苗工业化生产的低成本、稳定性和安全性的要求。本发明的技术方案包括以下内容：
用于非洲猪瘟病毒繁殖的细胞外囊泡提取来源于经过非洲猪瘟病毒感染后的易感细胞。对于非洲猪瘟病毒毒株的选择可适用于目前已发现的各种基因型（≥24种）。
对于易感细胞的选择，优选猪原代肺泡巨噬细胞，猪原代外周血单核巨噬细胞，猪骨髓分化来源的巨噬细胞。此外，也可选择WSL，MA104，Vero和COS-7等其他适应性易感细胞系。
对于细胞外囊泡的收集时间，优选感染非洲猪瘟病毒后的48-72小时。根据不同基因型非洲猪瘟病毒毒株繁殖特性和易感细胞特性，收获细胞外囊泡时间可在上述时间范围上做相应调整。
团队介绍
西北农林科技大学地处中华农耕文明发祥地、国家级农业高新技术产业示范区——陕西杨凌，是教育部直属、国家“985工程”和“211工程”重点建设高校，首批入选国家“世界一流大学和一流学科”建设高校，2022年入选国家第二轮“双一流”建设高校，2个学科入选“双一流”建设学科。
成果资料
成果综合评价报告
评价单位：- (-) 评价时间：2025-03-17
徐超
西北农林科技大学
教授
综合评价
该技术创新性很强，且技术成熟，投资回报比较可靠。
总体而言，该项技术思路方向很好，未来市场空间较大，有利于当前政策要求，转化成熟度高，值得支持推广。建议强化相应产品开发，加大产业链开发力度。
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