本发明涉及一种β?葡萄糖苷酶突变体及其应用,通过全质粒PCR对原有野生型Bacillus cereus W23Q的β?葡萄糖苷酶进行定点突变,制备单突变体库;采用PCR体系和程序进行全质粒PCR,结束后采用Dpn I酶消除模板,再将质粒转化到大肠杆菌Top10中,培养提取质粒保存并送测序;确定突变成功后,将质粒转化到表达宿主大肠杆菌BL21中,培养、诱导表达,即得到β?葡萄糖苷酶突变体。该突变体较野生酶能大幅度提高催化Rg3转化Rh2的效率。应用该菌种生产Rh2,能降低成本,便于工业化应用。
本发明的目的是提供一种β-葡萄糖苷酶突变体,以及将该突变体用于合成人参皂苷Rh2的方法。
实现本发明目的的技术方案是:
一种β-葡萄糖苷酶突变体,所述β-葡萄糖苷酶来源于野生型的Bacillus cereusW23Q,β-葡萄糖苷酶突变体的核苷酸序列如 SEQ ID NO:1所示,氨基酸序列如 SEQ ID NO:2所示,或者为SEQ ID NO:2所示氨基酸序列经以下至少一种突变情况所得:
将第197位的丙氨酸A突变为天冬氨酸D,简称A197D;
广西师范大学地处世界级旅游城市、国家历史文化名城桂林,是国家教育部与广西壮族自治区人民政府共建高校,“中西部高校基础能力建设工程项目”高校,广西重点建设的“国内一流大学”高校,全国文明校园。有王城、育才、雁山3个校区,校园面积4100多亩,各类学生50000多人,各类教职工4000多人(含离退休人员)。学校已发展成为广西教师教育的“领头羊”、人文强桂的“主力军”、科技兴桂的“生力军”、广西国际教育的“排头兵”。目前,学校正全力推进“双一流”建设和综合改革,努力实现建设国际知名、教师教育特色鲜明的国内一流大学的目标。
评价单位:- (-)
评价时间:2024-01-30
综合评价
技术转让,所需资金需双方协商,此项技术想尽快落地保定,希望具备此项技术研发的技术方,能够尽快承接次项目。
查看更多>