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肠道菌拟杆菌的基因编辑方法与应用

发布时间: 2023-11-09

来源: 试点城市(园区)

基本信息

合作方式: 技术服务
成果类型: 发明专利
行业领域:
生物与新医药技术,生物产业
成果介绍
本发明提供了一种肠道菌拟杆菌的基因编辑方法与应用,本发明的肠道菌拟杆菌的基因编辑方法包括:采用复制型质粒载体构建CRISPR/Cas编辑系统,对拟杆菌属进行目标基因的编辑。进一步,所构建的CRISPR/Cas编辑系统中,采用诱导型启动子表达Cas蛋白。本发明的方法是基于CRISPR/Cas系统构建的一种高效、无痕的基因编辑方法,在肠道菌拟杆菌属实现了流程化的基因组编辑,提高了靶向插入或敲除单个基因、基因簇的效率,可以得到无筛选标记的突变株。
成果亮点
1.一种肠道菌拟杆菌的基因编辑方法,该方法包括: 采用复制型质粒载体构建CRISPR/Cas编辑系统,对拟杆菌进行目标基因的编辑。 2.根据权利要求1所述的基因编辑方法,其中,所构建的CRISPR/Cas编辑系统中,采用诱导型启动子表达Cas蛋白。 3.根据权利要求1或2所述的基因编辑方法,其中,所构建的CRISPR/Cas编辑系统为CRISPR/FnCas12a、CRISPR/SpRY或CRISPR/SpCas9系统。 4.根据权利要求1所述的基因编辑方法,该方法包括: 质粒构建:构建包括p134-backbone、诱导启动子、Cas蛋白基因、gRNA和目标基因上下游同源臂的质粒; 化学转化大肠杆菌:将构建的质粒转化入大肠杆菌感受态细胞中,培养,并涂于含有筛选标记的平板; 野生型拟杆菌的接合和筛选:将含有质粒的大肠杆菌和野生型拟杆菌分别培养至对数期,混合,转移至无抗平板培养进行接合,之后在含有筛选标记的平板进行筛选;
团队介绍
中国科学院深圳先进技术研究院提升了粤港地区及我国先进制造业和现代服务业的自主创新能力,推动我国自主知识产权新工业的建立,成为国际一流的工业研究院。 深圳先进院目前已初步构建了以科研为主的集科研、教育、产业、资本为一体的微型协同创新生AC态系统,由九个研究平台,国科大深圳先进技术学院,多个特色产业育成基地、多支产业发展基金、多个具有独立法人资质的新型专业科研机构等组成。开展先进技术研究,促进科技发展。信息、电子、通讯技术研究新材料、新能源技术研究高性能计算、自动化、精密机械研究生物医学与医疗仪器研究相关学历教育、博士后培养与学术交流。
成果资料
产业化落地方案
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