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腺相关病毒表达载体及其构建、病毒制备、细胞标记方法
发布时间: 2023-11-09
基本信息
合作方式：
技术服务
成果类型：
发明专利
行业领域：
生物与新医药技术
成果介绍
本申请公开了一种腺相关病毒表达载体的构建方法，该方法包括：获取第一基因序列和第二基因序列，第一基因序列包括核定位蛋白基因序列、显色蛋白基因序列和受体蛋白基因序列；在第一基因序列引入酶切位点，对第一基因序列和第二基因序列进行酶切处理；其中，第二基因序列携带酶切位点；连接酶切处理后的第一基因序列与第二基因序列，得到腺相关病毒表达载体。本申请还公开了一种腺相关病毒的制备方法，一种细胞标记方法以及一种表达载体。通过上述方式，本申请可实现特定脑区的全脑特异类型神经元的标记定位。
成果亮点
1.一种腺相关病毒表达载体的构建方法，其特征在于，所述方法包括：
获取第一基因序列和第二基因序列，所述第一基因序列包括核定位蛋白基因序列、显色蛋白基因序列和受体蛋白基因序列；
在所述第一基因序列引入酶切位点，对所述第一基因序列和第二基因序列进行酶切处理；其中，所述第二基因序列携带所述酶切位点；
连接酶切处理后的所述第一基因序列与第二基因序列，得到所述腺相关病毒表达载体。
2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，
所述第一基因序列两端引入的酶切位点分别为NheI酶切位点和AscI酶切位点。
3.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，所述连接酶切处理后的所述第一基因序列与第二基因序列包括：
使用T4连接酶，连接酶切处理后的所述第一基因序列和所述第二基因序列。
4.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，
所述核定位蛋白为组蛋白，其基因序列如SEQ ID NO：2所示，所述显色蛋白为绿色荧光蛋白，其基因序列如SEQ ID NO：3所示，所述受体蛋白为禽类白血病病毒受体，其基因序列如SEQ ID NO：5所示。
团队介绍
中国科学院深圳先进技术研究院提升了粤港地区及我国先进制造业和现代服务业的自主创新能力，推动我国自主知识产权新工业的建立，成为国际一流的工业研究院。 深圳先进院目前已初步构建了以科研为主的集科研、教育、产业、资本为一体的微型协同创新生AC态系统，由九个研究平台，国科大深圳先进技术学院，多个特色产业育成基地、多支产业发展基金、多个具有独立法人资质的新型专业科研机构等组成。开展先进技术研究，促进科技发展。信息、电子、通讯技术研究新材料、新能源技术研究高性能计算、自动化、精密机械研究生物医学与医疗仪器研究相关学历教育、博士后培养与学术交流。
成果资料
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