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基于自动化技术构建的高附加值代谢物智能细胞工厂
发布时间: 2023-11-08
基本信息
合作方式：
技术服务
成果类型：
发明专利
行业领域：
生物与新医药技术
成果介绍
基于自动化技术构建的高附加值代谢物智能细胞工厂，属于代谢工程技术领域。本发明包括通过弱化高附加值代谢物的关键性酶基因表达，采用自动化技术，结合突变‑筛选‑突变的闭环式蛋白进化方法，从迭代的关键性酶基因突变文库中筛选出效率高的关键性酶突变体基因。还提供了一种高附加值代谢物智能细胞工厂的构建方法和应用。本发明可有效解决目前高附加值代谢物无高通量分子探针或者分子探针筛选不稳定的问题，减少人力成本，缩短蛋白进化时间，减少中间产物与终产物抑制效应，增强核心代谢通量，实现高附加值化合物高效合成。
成果亮点
1.基于自动化技术构建的高附加值代谢物智能细胞工厂，其特征在于通过弱化高附加值代谢物的关键性酶基因表达，采用自动化技术，结合突变-筛选-突变的闭环式蛋白进化方法，从迭代的关键性酶基因突变文库中筛选出效率高的关键性酶突变体基因。
2.如权利要求1所述的基于自动化技术构建的高附加值代谢物智能细胞工厂，其特征在于所述高附加值代谢物包括类黄酮化合物、类黄酮化合物衍生物、类黄酮化合物经修饰后的化合物，所述类黄酮化合物包括柚皮素、花青素、黄芩素或生松素。
3.如权利要求1所述的高附加值代谢物智能细胞工厂的构建方法，其特征在于包括以下步骤：
(1)将目标代谢物的关键性酶基因克隆至低拷贝数、弱启动子的质粒中，得到含有关键性酶基因的质粒；
(2)以上述步骤(1)得到的含有关键性酶基因的质粒为模板，采用易错PCR技术制备突变文库，结合Gibson技术，将上述突变文库连接至低拷贝数质粒上，经抗生素平板筛选质粒，经电转化至BL21(DE3)感受态，得到关键性酶基因突变文库；
(3)采用QPix自动化挑菌设备挑取上述步骤(2)得到的关键性酶基因突变文库中的突变体，进行发酵培养，得到突变体发酵液；
团队介绍
中国科学院深圳先进技术研究院提升了粤港地区及我国先进制造业和现代服务业的自主创新能力，推动我国自主知识产权新工业的建立，成为国际一流的工业研究院。 深圳先进院目前已初步构建了以科研为主的集科研、教育、产业、资本为一体的微型协同创新生AC态系统，由九个研究平台，国科大深圳先进技术学院，多个特色产业育成基地、多支产业发展基金、多个具有独立法人资质的新型专业科研机构等组成。开展先进技术研究，促进科技发展。信息、电子、通讯技术研究新材料、新能源技术研究高性能计算、自动化、精密机械研究生物医学与医疗仪器研究相关学历教育、博士后培养与学术交流。
成果资料
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