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一种基于衍生化的神经递质的MALDI-MS分析方法
发布时间: 2023-11-03
基本信息
合作方式：
技术服务
成果类型：
发明专利
行业领域：
物理
成果介绍
本发明提供了一种基于衍生化的神经递质的MALDI‑MS分析方法，属于生物分析化学技术领域，利用丹磺酰氯作为目标分析物的衍生化试剂，丹磺酰氯与生物胺类和氨基酸类小分子的衍生化反应效率高，机理明确，产物稳定；利用四甲基氢氧化铵等季铵碱提供碱性环境，季铵碱属于强碱，可以有效提供强碱性反应环境，促进反应进行，且不会引入氢氧化钠等强碱中涉及的碱金属离子干扰MALDI‑MS分析；神经递质小分子经过衍生化反应，产物在质谱中出峰避开了m/z 100‑200的区域，避免了常用基质对目标化合物出峰的干扰，提高了胺类神经递质的检出限；衍生化产物引入丹磺酰基生色团，电离效率得到提高，质谱出峰更强、检测更灵敏。
成果亮点
一种基于衍生化的神经递质的MALDI-MS分析方法，其特征在于，包括以下步骤：
步骤1：配制丹磺酰氯溶液作为衍生化试剂，用乙腈分散，得到衍生化试剂溶液；配制碱溶液；
步骤2：取样品，加入3-10倍样品体积的甲醇沉淀蛋白处理，提取清液；
步骤3：清液在氮吹下浓缩，将甲醇成分吹干，仅剩水相，得到样品提取液；
步骤4：将衍生化试剂溶液、碱溶液以及样品提取液按一定比例混合，涡旋混匀后放入水浴锅加热反应15-30min，反应温度为55-75℃；
步骤5：向反应后的混合溶液中加入一定量甲酸溶液以终止衍生化反应，之后涡旋混匀；
步骤6：配制α-氰基-4-羟基肉桂酸基质溶液，采用乙腈分散；
步骤7：采用MALDI质谱仪分析步骤5得到的混合溶液与步骤6得到的基质溶液按一定比例混合的混合溶液，监测多种神经递质衍生化产物对应的峰。
团队介绍
中国科学院深圳先进技术研究院提升了粤港地区及我国先进制造业和现代服务业的自主创新能力，推动我国自主知识产权新工业的建立，成为国际一流的工业研究院。 深圳先进院目前已初步构建了以科研为主的集科研、教育、产业、资本为一体的微型协同创新生AC态系统，由九个研究平台，国科大深圳先进技术学院，多个特色产业育成基地、多支产业发展基金、多个具有独立法人资质的新型专业科研机构等组成。开展先进技术研究，促进科技发展。信息、电子、通讯技术研究新材料、新能源技术研究高性能计算、自动化、精密机械研究生物医学与医疗仪器研究相关学历教育、博士后培养与学术交流。
成果资料
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