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重组载体及其构建方法和应用
发布时间: 2023-11-03
基本信息
合作方式：
技术服务
成果类型：
发明专利
行业领域：
物理
成果介绍
本申请涉及一种重组载体及其构建方法和应用。该重组载体的构建方法包括如下步骤：构建带有化学遗传学激活元件的sgRNA骨架质粒；向带有化学遗传学激活元件的sgRNA骨架质粒中插入sgRNA片段，sgRNA片段用于敲除vGAT，得到重组载体。上述重组载体的构建方法将CRISPR基因编辑技术和化学遗传激活技术结合，得到重组载体能够用于敲除GABA能神经元的vGAT，并通过能化学遗传学激活敲除vGAT的GABA能神经元，达到长时程激活敲除vGAT的GABA能神经元的目的。
成果亮点
1.一种重组载体的构建方法，其特征在于，包括如下步骤：
构建带有化学遗传学激活元件的sgRNA骨架质粒，所述化学遗传学激活元件用于激活神经元；及
向所述带有化学遗传学激活元件的sgRNA骨架质粒中插入sgRNA片段，所述sgRNA片段用于敲除vGAT，得到所述重组载体。
2.根据权利要求1所述的重组载体的构建方法，其特征在于，构建所述带有化学遗传学激活元件的sgRNA骨架质粒的步骤包括：
采用质粒重组技术将原始sgRNA骨架质粒与化学遗传学质粒进行质粒重组，所述化学遗传学质粒带有所述化学遗传学激活元件。
3.根据权利要求2所述的重组载体的构建方法，其特征在于，构建所述带有化学遗传学激活元件的sgRNA骨架质粒的步骤包括：
将所述原始sgRNA骨架质粒进行酶切，得到含有sgRNA骨架的片段；
将所述化学遗传学质粒进行酶切，得到含有所述化学遗传学激活元件的片段；及
将所述含有sgRNA骨架的片段和所述含有所述化学遗传学激活元件的片段连接，得到所述带有化学遗传学激活元件的sgRNA骨架质粒。
团队介绍
中国科学院深圳先进技术研究院提升了粤港地区及我国先进制造业和现代服务业的自主创新能力，推动我国自主知识产权新工业的建立，成为国际一流的工业研究院。 深圳先进院目前已初步构建了以科研为主的集科研、教育、产业、资本为一体的微型协同创新生AC态系统，由九个研究平台，国科大深圳先进技术学院，多个特色产业育成基地、多支产业发展基金、多个具有独立法人资质的新型专业科研机构等组成。开展先进技术研究，促进科技发展。信息、电子、通讯技术研究新材料、新能源技术研究高性能计算、自动化、精密机械研究生物医学与医疗仪器研究相关学历教育、博士后培养与学术交流。
成果资料
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