科创中国
一种铜绿假单胞菌工程菌的构建方法及应用
发布时间: 2023-10-30
来源: 科技服务团
基本信息
合作方式：
技术转让
成果类型：
发明专利
行业领域：
新材料技术
成果介绍
本发明公开了一种铜绿假单胞菌工程菌的构建方法及应用。构建方法包括以下步骤:敲除铜绿假单胞菌中pelF、pslA B、T3SS、Pf4和fabV基因或基因簇构建弱毒菌株PAO1Δ5,以此为底盘生物,在其基因组中融合表达prtN基因,同时在其细胞中过表达pelA、pslG、dspB以及lys,即为工程菌PAO1104。本发明工程菌PAO1104可在不同条件下启动两种细胞裂解机制,诱导工程菌裂解释放过表达的多糖水解酶PelA、PslG、DspB,从而快速破坏细菌生物被膜;以及释放不包含前导肽的溶葡萄球菌素蛋白Lys,裂解杀死被破坏的生物被膜中露出的金黄色葡萄球菌或工程菌接触到的金黄色葡萄球菌
成果亮点
本发明的有益特点是：通过过表达胞外多糖水解酶PelA、PslG和糖苷水解酶DspB，经酶解反应可特异性破坏细菌生物被膜结构中的骨架成分胞外多糖，从而快速破坏细菌生物被膜。此外，构建的工程菌中还表达了溶葡萄球菌素蛋白Lys，可裂解杀死被破坏的生物被膜中露出的金黄色葡萄球菌或工程菌接触到的金黄色葡萄球菌，解决环境中金黄色葡萄球菌污染问题。
另外，为了使过表达的目的蛋白在生物防治过程中更好的释放到胞外，本发明设计了两种裂解机制，使工程菌可以在不同条件下裂解释放出目的蛋白从而发挥作用，该方法亦可解决因工程菌逃逸带来的潜在威胁。同时，根据不同的生物防治需求，可在该工程菌中表达不同的目的蛋白并实现靶向投放，从而执行不同的生防功能，因此该工程菌的适用范围广泛，开发潜力巨大。
团队介绍
发明人：
林金水 王帅涛 张恒 牛艳婷 高倩倩 杨建社 成娟丽 张宁梅 朱旭飞 师瑜倩 艾亚楠 方波
延安大学是毛泽东同志亲自命名、中国共产党创办的第一所综合性大学。现为陕西省人民政府与教育部共建大学、陕西省高水平建设大学，陕西省一本招生院校、优秀应届本科毕业生免试攻读硕士研究生资格推荐院校、“优师计划”地方专项培养院校。
成果资料
产业化落地方案
成果综合评价报告
评价单位：“科创中国”陕西科技服务团 (陕西省科学技术协会) 评价时间：2023-12-06
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