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一对可分裂重组的末端脱氧核苷酸核酸转移酶及构建方法
发布时间: 2023-09-07
基本信息
合作方式：
技术服务
成果类型：
发明专利
行业领域：
生物与新医药技术
成果介绍
本发明涉及生物技术领域，尤其涉及一对可分裂重组的末端脱氧核苷酸核酸转移酶及构建方法。所述一对可分裂重组的末端脱氧核苷酸核酸转移酶包括由TdT经切割得到的两个TdT蛋白结构域，所述两个TdT蛋白结构域分别记为TdT‑D1和TdT‑D2，当所述TdT‑D1和TdT‑D2分别单独存在时不独立表现出TdT催化活性；当所述TdT‑D1和TdT‑D2同时存在且靠近时，TdT‑D1和TdT‑D2会发生重组并表现出TdT催化活性。本发明设计可分裂重组的TdT，通过调控TdT‑D1和TdT‑D2的相对距离，实现TdT酶活性的灵活调控。基于TdT‑D1和TdT‑D2的酶法DNA合成不再需要依赖保护剂和去保护剂即可实现DNA合成酶活性的调控，从而明显简化了DNA人工合成的循环步骤。本发明为灵活、简便地调控TdT酶活性提供了新模式。
成果亮点
1.一对可分裂重组的末端脱氧核苷酸核酸转移酶，其特征在于，包括由TdT经切割得到的两个TdT蛋白结构域，所述两个TdT蛋白结构域分别记为TdT-D1和TdT-D2，当所述TdT-D1和TdT-D2分别单独存在时不独立表现出TdT催化活性；当所述TdT-D1和TdT-D2同时存在且靠近时，TdT-D1和TdT-D2会发生重组并表现出TdT催化活性。
2.根据权利要求1所述的一对可分裂重组的末端脱氧核苷酸核酸转移酶，其特征在于，所述TdT-D1的N端连接有pMag，记为pMag-TdT-D1；所述TdT-D2的C端连接有nMag，记为TdT-D2-nMag；
在蓝光照射前，所述pMag-TdT-D1和TdT-D2-nMag单独存在时不独立表现出TdT催化活性；
在蓝光照射下，pMag和nMag会二聚并使所述TdT-D1和TdT-D2靠近，TdT-D1和TdT-D2会发生重组并表现出TdT催化活性。
3.根据权利要求2所述的一对可分裂重组的末端脱氧核苷酸核酸转移酶，其特征在于，所述pMag-TdT-D1和TdT-D2-nMag的摩尔比为1:1。
团队介绍
中国科学院深圳先进技术研究院提升了粤港地区及我国先进制造业和现代服务业的自主创新能力，推动我国自主知识产权新工业的建立，成为国际一流的工业研究院。 深圳先进院目前已初步构建了以科研为主的集科研、教育、产业、资本为一体的微型协同创新生态系统，由九个研究平台，国科大深圳先进技术学院，多个特色产业育成基地、多支产业发展基金、多个具有独立法人资质的新型专业科研机构等组成。开展先进技术研究，促进科技发展。信息、电子、通讯技术研究新材料、新能源技术研究高性能计算、自动化、精密机械研究生物医学与医疗仪器研究相关学历教育、博士后培养与学术交流。
成果资料
产业化落地方案
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