本发明涉及一种β-甘露聚糖酶活性的测定方法,其包括如下步骤:(1)以缓冲液A和魔芋粉制备底物溶液;(2)将粗酶液加入底物溶液中,在适宜温度下反应;(3)将粗酶液以与步骤(2)相同的比例加入缓冲液A中,在与步骤(2)相同的适宜温度下反应相同时间;(4)在比色管中分别加入步骤(2)和步骤(3)的所得溶液以及DNS试剂,沸水浴显色后定容;步骤(2)所得溶液以底物溶液作为空白,步骤(3)所得溶液以缓冲液A作为空白,以检测OD550nm值;(5)步骤(2)所得溶液OD550nm值减去步骤(3)所得溶液OD550nm值在标准曲线中查找对应生成甘露糖的量,并通过公式计算β-甘露聚糖酶活力。
本发明以Akino方法为基础,加入两个对照组,以此消除试验过程中发酵液中残留的魔芋粉造成的影响和底物溶液未被消耗的魔芋粉造成的影响。当以空白缓冲液做对照时,所得的酶活力变化趋势与实验组基本相同,均呈现了先缓慢上升,而后下降的趋势。而以水为对照时,波动较大,酶活变化趋势有时与实验组变化趋势并不完全吻合,此时此方法并不能排除发酵液中魔芋粉的影响。可见,以空白缓冲液作为对照时,可以更准确的描述酶活力变化趋势。
黑龙江大学(Heilongjiang University),位于黑龙江省哈尔滨市,是黑龙江省人民政府和中华人民共和国教育部、国家国防科技工业局共建的省属综合性大学,黑龙江省“双一流”建设国内一流大学A类高校,入选国家卓越法律人才教育培养计划、中西部高校基础能力建设工程、特色重点学科项目、国家建设高水平大学公派研究生项目、中国政府奖学金来华留学生接收院校、全国深化创新创业教育改革示范高校、教育部来华留学示范基地,是世界翻译教育联盟、中俄新闻教育高校联盟、中俄综合性大学联盟、上海合作组织大学、“一带一路”智库合作联盟成员单位。
评价单位:“科创中国”黑龙江科技服务团 (黑龙江省科学技术协会)
评价时间:2023-11-07
综合评价
技术前景广阔,具备技术成果转移转化要求。
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