科创中国
一种防治禽流感H5N1的重组杆状病毒疫苗的制备方法
发布时间: 2023-06-30
基本信息
合作方式：
技术转让
成果类型：
发明专利
行业领域：
卫生和社会工作
成果介绍
本发明涉及一种防治禽流感H5N1的重组杆状病毒疫苗的制备方法，具体涉及一种表达禽流感病毒血凝素HA基因的重组H5N1病毒疫苗株及其制备方法，具体包含以下步骤：1)pS?ITRs?HA质粒的构建，2)pS?ITRs?HA质粒转化*** DH10 Bac，3)重组杆状病毒穿梭载体转染Sf9昆虫细胞，4)重组杆状病毒的扩增。制备获得的重组H5N1病毒疫苗株对免疫鸡的血清进行免疫检测，免疫鸡血清中IgG抗体的水平最高可达***，IL?2、IL?4和IFN?γ的浓度最高可分别达到***、***和***，以上结果表明重组杆状病毒疫苗可有效的刺激鸡体同时产生体液免疫和细胞免疫，为鸡群提供了双重免疫保护作用，本发明为基于杆状病毒的禽流感疫苗的研发奠定理论基础。
成果亮点
血凝素HA作为禽流感病毒的主要保护性抗原，在其抗原性和致病性中发挥重要的作用。将H5N1型禽流感病毒HA基因克隆到由CMV启动的含有VSV-GED、WPRE、ITRs等调控元件的两组杆状病毒转移载体中，通过Bac-to-Bac系统获得重组BacmidDNA；通过对Sf9昆虫细胞的转染，收获重组杆状病毒；利用重组杆状病毒进一步侵染鸡胚成纤维细胞，检测HA基因在禽类细胞中的表达水平；将携带HA基因的重组杆状病毒直接作为疫苗进行鸡体免疫试验，将目的抗原基因高效地传递到家禽细胞中，使其有效地刺激机体产生特异性保护抗体和较强的细胞免疫应答；分析重组杆状病毒的表达时间及免疫效果，为基于杆状病毒的禽流感疫苗的研发奠定基础。
团队介绍
黑龙江大学（Heilongjiang University），位于黑龙江省哈尔滨市，是黑龙江省人民政府和中华人民共和国教育部、国家国防科技工业局共建的省属综合性大学，黑龙江省“双一流”建设国内一流大学A类高校，入选国家卓越法律人才教育培养计划、中西部高校基础能力建设工程、特色重点学科项目、国家建设高水平大学公派研究生项目、中国政府奖学金来华留学生接收院校、全国深化创新创业教育改革示范高校、教育部来华留学示范基地，是世界翻译教育联盟、中俄新闻教育高校联盟、中俄综合性大学联盟、上海合作组织大学、“一带一路”智库合作联盟成员单位。
成果资料
产业化落地方案
成果综合评价报告
评价单位：“科创中国”黑龙江科技服务团 (黑龙江省科学技术协会) 评价时间：2023-11-07
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