本发明涉及微生物发酵技术领域,具体地涉及一种纳豆菌发酵菜用大豆等外品产纳豆激酶的方法,包括:将配制好的纳豆菌菌液按2%接种到经挑选、清洗、蒸熟灭菌后的菜用大豆等外品中,在37℃恒温培养箱中发酵36小时,后熟18小时,盐溶离心得初提取液,硫酸铵盐析初步纯化得粗酶液,再用DEAE离子交换柱层析进一步纯化。本发明的目的是为发酵产纳豆激酶提供一种新的思路,以及为公司等外品的处理问题提供解决方案。最佳发酵工艺下生产的纳豆激酶活力可达到***;经SDS‑PAGE电泳试验验证,所提取的纳豆激酶的分子质量为25~35kDa之间,回收率和纯化倍数分别为***%和***倍;本发明为纳豆激酶的生产及后续的体内试验提供了理论基础。
与现有技术相比,本发明的一种纳豆菌发酵菜用大豆等外品产纳豆激酶的方法,采用菜用大豆等外品发酵生产纳豆激酶,发酵底物“新”且充足;发酵条件简单、快速,产酶活高;本发明为发酵产纳豆激酶提供一种新的思路,以及为公司等外品的处理问题提供解决方案。最佳发酵工艺下生产的纳豆激酶活力可达到***;经SDS-PAGE电泳试验验证,所提取的纳豆激酶的分子质量为25~35kDa之间,其比活力可达到***,回收率和纯化倍数分别为***%和***倍。纳豆激酶的最适温度为37℃,在低于40℃时稳定性较好,最适pH值为***,pH值在***~***的范围内较稳定;在胃肠道环境中不稳定,应制成肠溶性产品才能发挥更大作用;体外试验表明:该酶具有良好的体外溶栓作用。本发明为纳豆激酶的生产及后续的体内试验提供了理论基础。
黑龙江大学(Heilongjiang University),位于黑龙江省哈尔滨市,是黑龙江省人民政府和中华人民共和国教育部、国家国防科技工业局共建的省属综合性大学,黑龙江省“双一流”建设国内一流大学A类高校,入选国家卓越法律人才教育培养计划、中西部高校基础能力建设工程、特色重点学科项目、国家建设高水平大学公派研究生项目、中国政府奖学金来华留学生接收院校、全国深化创新创业教育改革示范高校、教育部来华留学示范基地,是世界翻译教育联盟、中俄新闻教育高校联盟、中俄综合性大学联盟、上海合作组织大学、“一带一路”智库合作联盟成员单位。
评价单位:“科创中国”黑龙江科技服务团 (黑龙江省科学技术协会)
评价时间:2023-11-10
综合评价
技术前景广阔,具备技术成果转移转化要求。
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