科创中国
一种定量检测单个原生质体和液泡内Cd2+ 的方法
发布时间: 2022-11-07
基本信息
合作方式：
技术转让
成果类型：
发明专利
行业领域：
生物与新医药技术,轻工和化工生物技术
成果介绍
本发明公开了一种定量检测单个原生质体和液泡内Cd2+的方法，属于植物生理毒理技术领域。本发明所述定量检测单个原生质体和液泡内Cd2+的方法，包括如下步骤：(1)在待测原生质体或者液泡悬液中加入LeadmiumTM Green AM探针溶液，孵育，洗净，得到待测悬液；(2)将步骤(1)得到的待测悬液进行荧光图像的拍摄，得到悬液中单个原生质体或者液泡的总荧光强度；(3)将步骤(2)得到的总荧光强度带入原生质体或液泡的标准曲线中，得到单个待测原生质体或单个液泡中Cd2+的含量(质量)。利用本发明的方法可以精确检测每一个龙葵叶片原生质体或液泡中Cd2+的含量，且准确率达到95％以上。
成果亮点
关于镉吸收和转运已经有从根到茎、叶，从组织到细胞和基因范围的研究，主要集中在拟南芥(Arabidopsis thaliana)、天蓝歇菜(Thlaspicaerulescens)、东南景天(SedumalfrediiHance)等Cd的超积累品种中。迄今为止的研究表明，重金属Cd转移到地上后会以一个不损害重要的细胞器和参与细胞生命活动的细胞溶质的方式储存，也就是储存在液泡中。这种解毒机制称为液泡区室化，是超积累植物的一种重要的解毒机制。[0004]然而目前对液泡区室化的过程了解并不透彻，因此，有必要从细胞甚至液泡水平更好地了解Cd的积累、运输和内部反应，从而为植物液泡区室化对Cd吸收和植物维持体内稳态的贡献提供见解。目前关于植物中Cd的检测都是检测总的镉含量，并未有文献公开使用线性标准曲线定量检测Cd2+，特别是单个原生质体中或者单个液泡中Cd2+的含量。为了解决上述至少一个问题，本发明采用了高选择性、低检出限的荧光探针LeadiumTM GreenAM和Cd2+相结合，通过荧光强度和Cd2+含量的对应关系，实现了原生质体和液泡内Cd2+的含量的检测。这是对单个原生质体或液泡中Cd2+
团队介绍
江南大学是教育部直属、国家“211工程”重点建设高校和“双一流”建设高校。在教育部组织的第四轮全国一级学科评估中，学校“轻工技术与工程”“食品科学与工程”位列A+档，“设计学”位列A-档；在2022年“软科世界一流学科排名”中，学校15个学科入选，食品科学与工程学科连续四年蝉联世界第一；在ESI全球影响评价排行榜上，学校农业科学、工程学、化学、生物学与生物化学、材料科学、临床医学、计算机科学、药理学与毒理学、环境与生态学9个学科进入全球前1%；学校位居ESI综合排行中国大陆第55名；在中国管理科学研究院编制的《2022中国大学评价》中，位居全国第45名。学校是全国教育系统先进集体、江苏省文明单位、江苏省平安校园。
成果资料
产业化落地方案
成果综合评价报告
评价单位：“科创中国”医疗康养产业科技服务团 (中国生物工程学会) 评价时间：2022-11-08
郭晓奎
上海交通大学
教授
综合评价
该项技术成果属于隔离子检测试剂研发中十分关键的原生质体或液泡中金属离子检测试剂研发技术领域，对原生质体或液泡中隔离子的开发及应用具有十分重要的指导价值，技术可操作性强，且技术成熟，投资回报高，目标市场处于成长市场，但该市场很快会出现多种技术路线，产品竞争会很激烈。
总体而言，该项目技术思路方向很好，未来市场空间大，有利于当前政策要求，转化成熟度很高，值得支持推广。
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