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近年来，实时荧光定量PCR技术及实时荧光定量RT-PCR技术由于具有灵敏度高，特异性强，能实现多重反应，具有自动化程度高、无污染性、实时性和准确性的优势，在分子诊断领域发展最快，应用最成熟也最常被采用。呼吸道病毒种类繁多，其中既有DNA病毒，又有RNA病毒，为了同时检测两种类型的病毒，可采用实时荧光定量RT-PCR方法。 多重实时荧光定量RT-PCR技术是在实时荧光定量RT-PCR技术上发展起来的一种技术，通过选定多重荧光通道，通过在1个反应体系之中加入多对引物与多条探针（分别标记不同的荧光基团），可实现对多种核酸模板的检测，即可进行多种呼吸道病毒的分子鉴别诊断。目前，由于荧光RT-PCR仪检测通道的限制，多色荧光体系检测最多只能实现4个或5个目标序列的同时检测，除了依靠科技进步不断增加检测通道数量，想要提高检测核酸样本数量必须另辟蹊径。在这个基础上，多色组合探针编码（Multicolor Recombination Probe Coding, MCPC）技术被提出。同时，同源加尾（Homo-Tag Assisted Non-Dimer, HAND）系统通过在上游引物和下游引物的5’端分别加上相同的标签，可以大大减少引物二聚体的形成，降低引物二聚体对荧光RT-PCR反应的干扰。 国内外的实验研究表明，利用目前应用广泛的多通道实时荧光定量RT-PCR仪，同时检测3种荧光因素完全可行。专家组一致认定方法可靠，适用于市场。