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脯氨酸羟化酶高活性自诱导表达方法及用其生产反式4-羟基-L-脯氨酸的高效转化方法
发布时间: 2022-10-26
基本信息
合作方式：
技术转让
成果类型：
发明专利
行业领域：
高技术服务业,生物医药技术
成果介绍
本发明公开了一种具有编码高活性反式-4-羟基-L-脯氨酸羟化酶的基因片段及其应用， 对指孢囊菌（***） 中 反 式-4-羟 基-L-脯 氨 酸 羟 化 酶（GenBankID:***）基因密码子进行优化获得p4hyd基因，对优化后p4hyd基因进行截短， 获得P4Hyd1-257基因， 分别构建重组质粒pET-M-3C-P4Hyd和pET-M-3C-P4Hyd1-257，通 过大肠杆菌进行原核表达， 以菌体作酶源转化生产反式-4-羟基-L-脯氨酸。 实验结果表明，以L-脯氨酸为底物， 相比于pET-M-3C-P4Hyd，pET-M-3C-P4Hyd1-257转化生成反式-4-羟基-L-脯氨酸的最高转化率由***%提高到***%， 转化反应时间由80小时缩短到60小时， 转化率得到明显提高， 转化时间明显缩短。本发明可用于生物转化法生产L-羟脯氨酸，具有较好的工业应用前景。
成果亮点
本发明公开了生物转化法生产反式-4-羟基-L-脯氨酸的高效转化方法， 具体包括重组大肠杆菌工程菌中L-脯氨酸羟化酶高活性自诱导表达方法和将L-脯氨酸转化为反式-4-羟基-L-脯氨酸的高效转化体系中助剂的种类、 浓度及转化条件， 为建立生物转化法工业化生产反式-4-羟基-L-脯氨酸工艺提供了重要科学依据。
团队介绍
河北师范大学是一所具有百年历史和光荣传统的省属重点大学。学校起源于1902年创建于北京的顺天府学堂和1906年创建于天津的北洋女师范学堂。1996年6月，原河北师范大学、河北师范学院与创建于1952年的河北教育学院、创建于1984年的河北职业技术师范学院合并，组建成新的河北师范大学。校友中有老一代革命家邓颖超、刘清扬、郭隆真、杨秀峰、康世恩、荣高棠等，有学界名人梁漱溟、张申府、汤用彤等，有中科院院士严陆光、郝柏林等，也有许绍发、蔡振华等一批体育界精英。新中国成立以来，学校共为国家培养了20余万名专业人才。 学校新校区占地1829亩，馆藏图书***万册。学校现有在职教职工2856名，其中专任教师1577人，教授405人，副教授994人，中国科学院院士1人，省级以上各类优秀专家106人，博士研究生导师108人，硕士研究生导师578人。在校本、专科生36371人，研究生4191人，成人教育学生14760人。
成果资料
产业化落地方案
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